Fejlesztés modern orvosság A diagnosztika világában soha nem szűnik meg ámulatba ejteni az eredményeit, és most az orvosnak nem kell feltételezéseket tennie a valószínű diagnózisról, csupán közvetett jelekre támaszkodva. Az enzim-linked immunoszorbens assay (ELISA) megalkotása és bevezetése a laboratóriumi kutatások világába lehetővé teszi nemcsak a kórokozó jelenlétének gyors és pontos meghatározását, hanem a betegség számos egyéb jellemzőjét is.

Az ELISA létrehozásának és fejlesztésének története

Ezt a vérvizsgálati módszert a gyakorlati gyógyászatban a múlt század közepén kezdték alkalmazni - valahol a 60-as években. Kezdeti célja a szövettan tudományos kutatása volt, amely a biológiai fajok sejtantigénszerkezetének felkutatására és vizsgálatára korlátozódott. Az ELISA vérvizsgálat a rokon antigének (AG-k) és specifikus antitestek (AB-k) kölcsönhatásán alapul, és egy enzim által meghatározott „antigén-antitest” komplex képződik.

Ez a jelenség késztette a tudósokat arra a döntésre, hogy a módszer segítségével felismerhetőek a különböző osztályokba tartozó fehérjevegyületek, amelyek a vérszérumban képződnek, amikor egy kórokozó a szervezetbe kerül. Az immunrendszer működésében való közvetlen szerepük miatt ezeket a vegyületeket immunglobulinoknak (IG) nevezték el, és a felfedezés a legnagyobb áttörést jelentette a laboratóriumi diagnosztikában.

Ugyanakkor ezt a rendkívül érzékeny módszert csak a 80-as években kezdték aktívan alkalmazni, és csak a magasan specializálódott szakemberekben volt elérhető. egészségügyi intézmények. A legelső állomások és vérátömlesztési központok, venerológiai és fertőző betegségeket kezelő intézmények használhatták az immunenzim analizátorokat. Ennek oka a „XX. század pestisének” - az AIDS - gyors terjedése volt, és sürgős diagnosztikai és terápiás intézkedésekre volt szükség.

A technika lehetőségei

Az ELISA vérvizsgálat alkalmazási köre meglehetősen széles - jelenleg elképzelhetetlen, milyen bonyolulttá válna számos betegség okának keresése. Az ilyen kutatásokat ma már szinte minden orvosi területen alkalmazzák, még az onkológiában is. A tájékozatlanok számára ugyan nehezen érthető, de egyes esetekben mégis megtörtént, és a daganat korai stádiumában történő felismerésével sikerült megmenteni a betegek életét.

Fontos! Az ELISA egy olyan vérvizsgálat, amely bizonyos rosszindulatú folyamatokra jellemző markereket mutat, ami lehetővé teszi a betegség olyan időpontban történő kimutatását, amikor más módszer nem képes rá.

A modern diagnosztikai központokban a laboratóriumi vizsgálatokat nem csak a tumormarkerek képviselik - a diagnózis elvégzésére szolgáló panelek lenyűgöző arzenáljával vannak felszerelve. Segítségükkel meghatározhat egy halmazt kóros állapotok, mint például a hormonális egyensúlyzavarok és a különböző eredetű fertőző folyamatok.

Ezenkívül az ELISA vérvizsgálat elvégzése és értelmezése lehetővé teszi a hatás nyomon követését orvosi eszközök beteg ember, sőt állat testén. Ez utóbbit széles körben alkalmazzák az állatorvosi rendelőkben, segítve kedvenceink vagy etetőink egészségének megőrzését, biztosítva az étrendben nélkülözhetetlen hús, tejtermék és tojás stabil ellátását.

Így mindössze néhány milliliter vénás vér összegyűjtése és ELISA módszerrel történő diagnosztizálása eredményeként az orvos a kutatási anyagok ismertetése után képes lesz meghatározni:

• biológiailag összefüggő hormonális állapot hatóanyagok reproduktív és pajzsmirigy, valamint mellékvese;
• bakteriális és vírusos fertőzés(hepatitis B és C, szifilisz, herpesz, chlamydia, tuberkulózis, myco- és ureaplasmosis, HIV, TORCH) és más ilyen jellegű betegségek;
• a kórokozó aktivitásának jelei kóros folyamat, amely gyógyulással zárult és átment az antitestek képződésének szakaszába (immunválasz).

Az ilyen komplexeket az immunsejtek sokkal könnyebben felismerik és eltávolítják. A visszamaradó hatások antitestek formájában sok esetben a vérben jelen vannak az életben, ami gyakorlatilag nullára csökkenti az újrafertőződés kockázatát.

Az immunglobulinok típusai

Számos típusú antitest létezik, és mindegyik részt vesz az immunválasz folyamatában egy bizonyos szakaszban. Például az M osztályú immunglobulinok (IgM) az elsők, amelyek az antigén szervezetbe jutására adott válaszként alakulnak ki. Legnagyobb arányuk a betegség első napjaiban figyelhető meg.

Az ELISA-ban használt immunglobulinok típusai

Akkor az immunrendszert G osztályú IG-ket (IgG) bocsát ki a plazmába, amelyek felelősek az antigének teljes elpusztulásáért és a beteg gyógyulásáért. Később továbbra is a vérben vannak, ezáltal felkészítve az immunrendszert egy azonos kórokozóval való ismételt expozícióra. Így működik az oltás. Ha a kóros mikroorganizmusok legyengített antigénjeit bejuttatják, sok immunglobulin jelenik meg és kering a plazmában.

A laboratóriumi diagnosztika legfontosabb tárgyai az M, G és A Ig osztályok. Koncentrációjuk szintje alapján meghatározhatja a betegség stádiumát, és megtudhatja, milyen fertőző betegségekben szenvedett egy személy életében. Például ellenőrizheti, hogy volt-e előzmény bárányhimlő vagy rubeola. Annak megállapításához, hogy egy bizonyos típusú AT vagy AG jelen van-e a páciens testében, vagy bármely hormon koncentrációja, az orvosnak nem kell több laboratóriumi vizsgálatot előírnia - elegendő, ha kiír egy beutalót az ELISA-ra.

A technika lényege

A kutatási módszertan a rábízott feladatok ellátásának több lehetőségén (közvetlen és közvetett - versengő és nem versengő) alapul, amelyek mindegyike meghatározott célt szolgál. Ez a megközelítés lehetővé teszi a célzott keresést és a lehető legrövidebb időn belül egy adott patológia okának azonosítását. A különböző osztálykategóriájú Ig kimutatására 96 ​​lyukú lemezt (polisztirol panelt) használnak, melynek üregeiben szorbeált rekombináns fehérjéket helyeznek el. Az antigének szerepét töltik be, és a kezdeti szakaszban szilárd fázisban vannak.

Amikor belépnek egy lyukba vérplazmával, az antigének vagy antitestek irányuk alapján azonosítják az objektumot, és komplexet képeznek (AG - AT). Ezt a képződményt egy enzimvegyület (konjugátum) rögzíti, amely a későbbiekben a lyuk megváltozott elszíneződésében nyilvánul meg. Az ELISA-t speciális laboratóriumokban gyártott, teljes reagenskészlettel felszerelt tesztrendszerekkel végzik.

Ez az elemzés elvégezhető alátétekkel és leolvasási spektrométerekkel, de ezek kézi munkát igényelnek. Természetesen a laboratóriumi technikusnak többször kényelmesebb és gyorsabb az összes manipulációt teljesen automatizált műszereken elvégezni. Használatuk során a laboratóriumi személyzet nagy mennyiségű monoton tevékenységtől - mosástól, csepegtetéstől és egyéb rutinmunkától - megszabadul, de nem minden egészségügyi intézmény engedheti meg magának ilyen drága felszerelést.

Ezért sok kórház és diagnosztikai intézmény továbbra is a régi módon - félautomata gépekkel - végzi az ELISA-t.

A kutatási anyagok értelmezése kizárólag a laboratóriumi diagnosztikai szakember feladata - csak ő mondhatja el az eredményeket a betegség lefolyásának sajátosságairól és finomságairól. Ebben az esetben az orvosnak figyelembe kell vennie a hamis negatív vagy hamis pozitív válaszok lehetőségét.

Dekódoló anyagok

A minőségi immunoassay diagnosztika eredménye egyértelmű következtetés kell, hogy legyen - hogy a kívánt mikroorganizmus megtalálható-e az adott vérmintában vagy sem. Mennyiségi elemzés a koncentráció szintjét jelzi, és kétféleképpen fejezhető ki - számokkal vagy „+” jelek számával.

Elemzett mutatók

A kutatási folyamat gondosan megvizsgálja az immunválaszban részt vevő fő immunglobulinokat, mint például:

• IgM – ennek az osztálynak a kimutatása egy fertőző betegség akut formájának kialakulását jelenti. Az IgM keresésének negatív eredménye vagy bizonyítéka lehet a kívánt kórokozó hiányának vagy a betegség krónikus lefolyásra való átmenetének.
• Az IgA ennek az osztálynak a meghatározása az IgM hiányában a legtöbb esetben, ami egy fertőző betegség krónikus vagy látens formájának kifejlődésének jele.
• IgM és IgA (egyidejű jelenlét) - mindkét típus pozitív eredményei a patológia akut formájának csúcsát jelzik.
• IgG – jelenléte a betegség krónikus formává vagy gyógyulásba való átalakulását és immunitás kialakulását jelzi a meghatározott szerrel szemben.

Az IG egy bizonyos osztályának megjelenése és felhalmozódása különböző időpontokban történik. Így például az IgM először jelenik meg, körülbelül 5 nappal a kórokozóval való érintkezés után. Az IG-k körülbelül 5-6 hétig maradnak a vérben, majd fokozatosan eltűnnek. Jelenleg ELISA-val meghatározhatóak. Körülbelül 3-4 héttel a betegség kezdete után megjelenik az IgG, amely ezt követően több hónapig is megmaradhat. De ezeket nem mindig lehet kimutatni az elemzés során.

Az IgA 2-4 hét alatt képződik a vérben, melynek 20%-a a szérumban, 80%-a a nyálkahártya váladékában található. Ezek az immunglobulinok általában 2-9 héten belül eltűnnek, ami a kórokozó elpusztulását és a beteg gyógyulását jelzi. Ha az ELISA továbbra is IgA jelenlétét mutatja, akkor ez a folyamat krónikus formába való átmenetét jelzi.

Az elemzési eredmények beállításai

A kapott adatoktól függően az ELISA-válaszok kiadhatók egy űrlapon, táblázat formájában, amely tartalmazza az összes AT és AG teljes listáját, és jelzi a pozitív vagy negatív reakciót. Bizonyos helyzetekben mennyiségi érték jelenik meg – erősen pozitív, pozitív, gyengén pozitív vagy negatív. A második lehetőség a vizsgált vérmintában lévő AT mennyiségét jelzi.

Az ELISA anyagok értelmezésének lehetőségei

A fenti értékeken kívül az ELISA eljárás egy másik kvantitatív paramétert is megvizsgál - az AT aviditási indexet, százalékban számolva. Megmutatja, hogy mennyi ideig tart a betegség - vagyis minél magasabb a mutató, annál hosszabb ideig tart a patológia kialakulása.

Alternatív ELISA módszer

Kapcsolt immunszorbens vizsgálat a vér meglehetősen jól ismert és gyakori diagnózis. Vannak, akik még nem is hallottak róla, de van egy még kevésbé ismert fajta ez a tanulmány, amelyben nem vérmintát vesznek. Ezt a technikát széklet okkult vérvizsgálatnak nevezik, és sok esetben lehetővé teszi a további kimerítő eljárások elkerülését, amelyek kellemetlen érzésekkel is járnak.

Az okkult vér (hemoglobin molekulák) ELISA tesztje lehetővé teszi a szervek vérzésének kimutatását emésztőrendszer, akár csekélyek is, amelyeknek a jelei, mint mondják, szabad szemmel nem találhatók meg a beteg székletében. Az emberi ürülékben lévő rejtett vér enzimes immunológiai vizsgálata rövid időn belül kimutatható gyomorfekély, polipózis, divertikulózis, daganatok, melyeket a korai stádiumban nem kísérnek specifikus tünetek.

Napjainkra több ezer fajta enzimhez kötött immunszorbens diagnosztikai tesztrendszert hoztak létre, amelyek lehetővé teszik az AT-k és AG-k kimutatását a patológiák hatalmas listájáról. Ezért ezt az elemzést az orvostudomány szinte minden ágában alkalmazzák, bármely korcsoportban. És abszolút ártalmatlansága lehetővé teszi, hogy mind a terhesség alatt, mind a legyengült betegek diagnosztizálására használják.

A szervezet állapotának (különösen a védőfunkcióinak) átfogó felméréséhez enzim-kapcsolt immunszorbens tesztet (ELISA) írnak elő. Az ELISA vérvizsgálatot fertőző, autoimmun, hematológiai patológiák, elsődleges és másodlagos immunhiányok diagnosztizálására végezzük. Ebben a cikkben azt javasoljuk, hogy részletesebben megvizsgáljuk, mi az ELISA vérvizsgálat, valamint milyen jelzések léteznek annak végrehajtására.

Az ELISA módszerrel végzett vérvizsgálat felírásának indikációi és működési elve

Amint azt már megjegyeztük, az ELISA módszerrel végzett vérvizsgálat olyan laboratóriumi vizsgálat, amelyen keresztül antigéneket vagy antitesteket határoznak meg a vérmintában. Ez az elemzés a hormonok, immunológiai komplexek és immunglobulinok szintjének kimutatására szolgál. Az ELISA elemzésre a következő jelzések vonatkoznak:

• Az allergia diagnosztizálása.
• Vírusos eredetű betegségek diagnosztizálása - Epstein-Barr vírus, herpesz, hepatitis, citomegalovírus.
• Szexuális úton terjedő fertőzések diagnosztizálása - mycoplasma, ureaplasma, szifilisz, trichomonas, chlamydia.
• Az immunhiány definíciója.
• Az onkológiai patológiák diagnosztizálása.
• A terápia hatékonyságának értékelése.
• A hormonszint meghatározása.
• Preoperatív átfogó vizsgálat.

Az enzim immunoassay működési elve az immunglobulinok (specifikus antitestfehérjék) jelenlétére vonatkozó vérvizsgálaton alapul. Az immunglobulinokat az immunrendszer termeli, amikor az antigének (idegen mikroorganizmusok) belépnek az emberi szervezetbe. Ezek az immunmolekulák különféle fertőző kórokozókhoz kötődnek és semlegesítik azokat. Fontos jellegzetes tulajdonsága az immunglobulinok sajátossága. Ezeknek a jellemzőknek köszönhetően egy specifikus antigénhez kötődve antigén-antitest komplexet képezhetnek. Az ELISA vérvizsgálat elvégzésekor ezt a komplexet mennyiségileg és minőségileg határozzák meg.

E vizsgálat elvégzéséhez gyakran emberi vért használnak. Az üvegtest tartalma, a magzatvíz és a cerebrospinális folyadék azonban felhasználható elemzéshez. A vérmintát általában a páciens antecubitalis vénájából veszik. Javasoljuk, hogy éhgyomorra adjon vért (legalább 12 órának el kell telnie az utolsó étkezés óta). Ha a beteg veszi gyógyszerek Feltétlenül tájékoztassa kezelőorvosát, mert ezek közül néhány befolyásolhatja a vizsgálat eredményét. A vizsgálati eredmények megbízhatóságát a drog- és alkoholfogyasztás is befolyásolja.

Az ELISA vérvizsgálatának értelmezése

Ennek az elemzésnek az űrlapja általában negatív (-) vagy pozitív (+) eredményt jelez az egyes immunglobulin-osztályok kiszámításához.

Javasoljuk, hogy fontolja meg az ELISA vérvizsgálat valószínű értelmezésének értelmezését.

• Az IgG, IgA nem észlelhető, és az IgM eredmény negatív - teljes gyógyulás.
• Az IgM, IgA, IgG eredménye negatív – nincs immunitás a fertőzésekkel szemben.
• Az IgG, IgA eredménye pozitív és negatív, valamint az IgM eredménye pozitív - akut fertőzés jelenléte.
• IgG pozitív és negatív IgA eredményés IgM – oltás utáni vagy fertőzés utáni immunitás.
• Az IgG, IgA pozitív vagy negatív eredménye és az IgM negatív eredménye – krónikus fertőzés.
• Az IgG, IgM, IgA eredménye pozitív - a krónikus fertőző patológia súlyosbodása.

A vér enzimes immunoassay-jében az antitestek osztályának meghatározása mellett azok mennyiségi mutatói is feltüntetésre kerülnek az átiratban. Ezekről azonban csak a kezelőorvos ad részletes magyarázatot.

A tanulmány erősségei és gyengeségei

• Viszonylag alacsony költség.
• Egyszerű használat.
• Diagnózis lehetősége a gyanús betegség korai szakaszában.
• A kapott adatok viszonylag nagy pontossága.
• A kutatási eredmény megszerzéséhez szükséges rövid idő.
• A szervezetben a fertőző folyamat fejlődésének dinamikájának nyomon követésének képessége.
• Magas szintű egységesítés, amely lehetővé teszi a tömeges felmérések lebonyolítását.
• A kutatás minden szakaszának automatizálása.

Az ELISA vérvizsgálat hátránya, hogy meglehetősen ritka esetekben álpozitív vagy álnegatív eredményt ad. A vizsgálat során a technikai hibákon túlmenően a betegnél a hamis eredmények oka lehet a rheumatoid faktor, a krónikus betegségek(amelyben antitestek termelődnek), bizonyos gyógyszerek szedése, anyagcserezavarok.

• Giardiasis.
• Ascariasis.
• Cysticercosis.
• Amőbiázis.
• Trichinosis - a vizsgálatot többször is elvégzik, az antitestek maximális szintjét a fertőzés után 4-12 héttel határozzák meg.
• Taeniasis.
• Opisthorchiasis - differenciáldiagnózist végez a betegség akut és krónikus formái között.
• Toxoplazmózis.
• Fascioliasis - a betegség akut szakaszában meghatározzák az antitestek jelenlétét.
• Bőr vagy zsigeri leishmaniasis.

Összefoglalva tehát: az antigének (a paraziták salakanyagai és azok jelenléte), valamint az antitestek (immunglobulinok) azonosításához szükség van a paraziták ELISA tesztjére. Ennek a kutatási módszernek a specifikussága a paraziták azonosításában a statisztikai adatok szerint körülbelül 90%. Ennek az elemzésnek köszönhetően az orvos pontosan meghatározhatja a paraziták típusát, azok típusát teljes, valamint nyomon követheti a kóros folyamatok fejlődésének dinamikáját az antitestek szintje miatt.

Időről időre az orvosok ELISA-teszteket írnak elő, nem mindenki tudja, mi ez. Az ELISA a következő dekódolást tartalmazza: a vér enzimes immunoassay-je. Egy ilyen vérvizsgálat segít megérteni, hogyan küzd a szervezet a fertőző betegségekkel, és bemutatja a betegség fázisát. Az enzimes immunoassay segít felmérni a vér védőaktivitását, azonosítani az immunhiányt fertőzésekkel, hormonális problémákkal stb. összefüggő patológiákban.

Az ELISA vérvizsgálat vénából vett anyaggal működik. Ezen túlmenően, az üvegtest tartalma, a folyadék a gerincvelő, húgycső tampont ill nyaki csatorna. Az enzim immunoassay ELISA-hoz a magzatot körülvevő folyadék terhes nőktől vehető.

Ebben az esetben a vér közvetlenül ELISA-teszttel végezhető különböző technikákkal. Van közvetlen, közvetett, versengés és blokkolás. Amikor a szervezetet megfertőzik valamilyen kórokozóval, amelyet antigénnek neveznek, az immunrendszer specifikus antitesteket kezd termelni, például a hepatitis ellen. Ezek az antitestek arra irányulnak, hogy „küzdjenek” az idegen ágensekkel. Mik azok az antitestek? Ezek speciális fehérjék, amelyek kölcsönhatásba léphetnek az antigénekkel, és immunológiai komplexeket képeznek, amelyeket antigén-antitestnek neveznek. Ezeknek a komplexeknek a kimutatásáért az ELISA diagnosztika a felelős. Az antigén kimutatásához antitesteket adnak a kapott vérmintához, vagy fordított eljárást hajtanak végre.

A pozitív ELISA eredmény az immunrendszer és az enzimek reakcióján alapul. Az első hatására fertőző ágensek és sejtelemek kötődnek, a második segít az első eredményének vizualizálásában. Az immunreakció antitest és antigén kombinációt foglal magában. Ennek a folyamatnak az eredményeként immunkomplex képződik. Minden sejt felületén antigén található. Az immunsejt befogja a gyanúsat, a felszínen rögzült antigén pedig összehasonlító eljáráson esik át a memóriába „betöltődő” információkkal. Ha van egyezés a leírásban, akkor a sejt hazatér, de ha nem, akkor kapcsolat jön létre, aminek létrejötte a felszínhez kötődő antitestért felelős.

Az enzimatikus reakció eközben lehetővé teszi, hogy az anyagok újakká alakuljanak át. Az anyagot enzimnek teszik ki. Ebben az esetben az enzimatikus különbséget különböző szubsztrátok biztosítják. A reakció eredményeként kapott terméket a kórokozó mennyiségének meghatározására küldjük, amelynek meghatározása az oldat színének sűrűségén alapul.

A módszer jellemzői

Enzim-immunoassay vérvizsgálatot írnak elő, ha allergia és vírusos eredetű betegségek diagnosztizálására van szükség. ELISA-teszt is létezik a szifiliszre és számos más olyan fertőzésre, amelyek nem védett szexuális érintkezés útján terjednek. Ez a diagnózis egyre népszerűbb a PCR-hez képest. A tény az, hogy a PCR magában foglalja a kenetekkel való munkát. A PCR-rel ellentétben az ELISA eredmények vérvizsgálatokból nyerhetők.

Ezenkívül ELISA módszerrel vérvizsgálat írható elő, ha szükséges az immunhiány jelenlétének megállapítása, az onkológia diagnosztizálása, a kezelés hatékonyságának felmérése, a hormonszint meghatározása és a műtét előtti teljes vizsgálat.

Ha összehasonlítja az ELISA-vizsgálatokat, például a PCR-rel, számos előnyt fedezhet fel. A legfontosabb dolog a teljes diagnózis lehetősége még a fejlődés legkorábbi szakaszában is. Ezenkívül az ELISA-eredmények segítenek meghatározni a betegség konkrét stádiumát és fejlettségi szintjét.

Az ELISA teszt hatékonyabb a PCR-hez képest, ráadásul terhesség alatt is alkalmazható STD-k kimutatására. Bárki, aki elvégezte ezt a tesztet, megtudhatja a TSH koncentrációját a vérszérumban. Ez nagyon fontos annak ellenőrzéséhez, hogy mi a pajzsmirigy reakciója, nincs-e működési rendellenesség.

További előnye azonban a polimeráz láncreakciónak, a vizsgálat gyorsasága, ami gyors eredményeket jelent. Az orvosok is nagyra értékelik az eredmények pontosságát. Ha STD-kről beszélünk, akkor a szint eléri a 98 százalékot, akárcsak a TSH koncentrációja.

Természetesen van néhány hátránya. Ebben az esetben azonban a teszt közvetett jellemzőiről beszélünk. Különösen arról van szó, hogy lehetetlen kizárni az esetleges hibákat a szabványok meghatározásában. Néha egy teljesen egészséges lány tesztje hamis pozitív eredményt, vagy ellenkező esetben negatív eredményt mutathat. A pszichológiai kutatási módszerek osztályozása azonban a legtöbb esetben az ilyen hiányosságokat a nem megfelelő előkészítéssel vagy annak a technikának a megsértésével társítja, amellyel az anyagot gyűjtötték.

Végrehajtási jellemzők

Az ELISA elemzéshez a legtöbb esetben vért adnak. Véradás előtt fontos, hogy legalább nyolc órát koplaljon, és kerülje a vizsgálat eredményét befolyásoló számos gyógyszer szedését. Beszélünk az antihisztaminokról és hormonális gyógyszerek befolyásolja a pajzsmirigy működését. Ezenkívül az alkoholt legalább 24 órán keresztül ki kell zárni. Győződjön meg arról, hogy a véradás előtt legalább egy órával nem dohányzik. Az eredmény torzulása kábítószer-fogyasztás esetén is lehetséges.

Mielőtt rátérnénk az átiratra, érdemes megemlíteni, hogy milyen mérési módszereket alkalmaznak egy ilyen teszthez. A vizsgálat eredménye antitesteket vagy Ig immunglobulinokat jelez. A korábban tárgyalt nagyon specifikus fehérjéket jelentik. A B-limfociták felelősek termelésükért, amint vírusok, baktériumok vagy gombák bejutnak a szervezetbe. Ötféle immunglobulin létezik, amelyeket a latin ábécé jelöl.

Különbségeik különböző molekulaformákhoz és tömegekhez kapcsolódnak. Különböző felezési idejük van, és különböző módon vesznek részt vagy nem vesznek részt a fertőző folyamatokban. Ugyancsak változó az az időkeret, amelyen belül a fertőzés fellépésétől kezdve észlelhetők.

Ha az immunglobulinokat molekulatömeg alapján osztályozza, akkor az IgM a legmagasabb mutatókkal rendelkezik. Az ilyen típusú immunglobulinok jellemzője, hogy nem tudnak átjutni a placenta gáton. Ha újszülöttnél IgM-et mutatnak ki a tesztben, akkor a magzati fertőzés jelenlétéről beszélünk.

Az emberi vér túlnyomó többsége IgG immunglobulinokat tartalmaz, amelyek közül a legkevesebb az IgE. A belső munkáról beszélünk fertőző folyamatok, különös jelentőséget kell tulajdonítani az A, M, G opcióknak. Az IgE markerként működik allergiás reakció. Az IgD csak a nyirokcsomók és a mandulák szöveteiben található. Ez a helyi immunitás megteremtése szempontjából fontos.

Ezenkívül az elemzés meghatározza az antigéneket. Ezeken nagy molekulatömegű anyagokat értünk, amelyek szerves eredetükről ismertek. Különösen a fertőző és más spektrumú betegségek kórokozóiról beszélünk. Ezen túlmenően olyan anyagokra is gondolunk, amelyek különböző sejtelváltozásokat jeleznek, amelyek számos betegségben elkerülhetetlenek. Egy immunkomplex is javallt, amely egy olyan antigén-antitest komplexet mutat, amely részt vesz az immunfolyamatban.

A gyártási idő általában attól függ, hogy melyik laboratóriumhoz fordult. Egyes laboratóriumok egy-két napon belül képesek eredményt adni, mások egy hétig tartanak. A késések oka lehet bizonyos mennyiségű szérum felhalmozódása.

Az eredményekre és az értelmezésre gyakorolt ​​hatás

Annak ellenére, hogy az ELISA-t az egyik legpontosabb vizsgálati módszernek tartják, hibák továbbra is előfordulnak. Az anyag felvételének eljárása, az anyag nem megfelelő szállítása és tárolása befolyásolhatja az eredmények helyességét. A gyógyszerek szedése, amint azt fentebb említettük, rejtett betegségek jelenléte. Az anyagcserezavarok vagy az immunhiány szintén nem teszi lehetővé a megfelelő mutatók elérését. Az egy évig tartó életkorban az újszülöttek mutatói is pontatlanok lehetnek. Ez annak a ténynek köszönhető, hogy az anyai antitestek jelen vannak a szervezetben.

Ha a dekódolásról beszélünk, az elemzési űrlapok pozitív vagy negatív előjellel jelzik az egyes immunglobulin-osztályok számítási eredményeit. A következő lehetséges lehetőségek.

A kimutatott IgG, IgA és IgM hiánya teljes gyógyulást jelez. Az olyan komponensek negatív eredménye, mint az IgM, IgA, IgG, a fertőzésekkel szembeni immunitás hiányát jelenti.

Az IgG pozitív és negatív eredményének kombinációja, az IgA pozitív IgM-mel kombinálva fertőzés jelenlétét jelzi a szervezetben. akut forma. A pozitív IgG eredmény negatív IgA és IgM indikátorokkal kombinálva a vakcinázás utáni időszaknak vagy a fertőzés következtében kialakult immunitásnak felel meg.

Az IgG, IgA pozitív vagy negatív eredményének és az IgM negatív eredményének kombinációja a fertőzés krónikus lefolyásában való jelenlétét jelzi. A három komponens pozitív eredménye: IgG, IgM, IgA a fertőzés súlyosbodását jelzi, amely krónikus formában volt. Az antitestosztályok közvetlen tisztázása mellett az ELISA elemzés megfejtésének részeként az orvos információt kap azok mennyiségi mutatóiról. Fontos hangsúlyozni, hogy a dekódolásért a kezelőorvosnak kell felelnie. A helyzet az, hogy egyes összetevők kombinációja arra késztetheti, hogy a kapott hamis eredményre gondoljon, ami a teszt megismétléséhez vezet. A független visszafejtés ebben az esetben haszontalan.

(ELISA) egy módszer a vér laboratóriumi vizsgálatára, amely speciális sejtek - különféle betegségek elleni antitestek - keresésén alapul. A módszer nemcsak a kórokozó azonosítását teszi lehetővé, hanem annak meghatározását is, hogy melyik szakaszban van a kóros folyamat. Ez utóbbi nagyon fontos a beteg prognózisa és további kezelése szempontjából.

A módszer előnyei és hátrányai

A modern diagnosztikai módszerek közül az ELISA a leginnovatívabb és technikailag legpontosabb. Fő előnyei a következők:

1. A fertőző betegségek elleni összes létező antitest felkutatásának képessége a páciens vérében.
2. A kutatási módszer magas hozzáférhetősége. Ma már bármely közepes méretű laboratórium elvégezheti az ELISA-teszteket.
3. A módszer csaknem 100%-os specificitása és érzékenysége.
4. Az antitestek és antigének keresésének képessége, valamint a kóros folyamat stádiumának megállapítása és dinamikájának nyomon követése a mennyiségek összehasonlításának köszönhetően.

Ez a számos előny más tesztekkel szemben teljesen beárnyékolja a teszt egyetlen hátrányát: képes kimutatni az antitesteket, de magát a kórokozót nem.

Kulcsfogalmak az elemzés értékeléséhez

Annak érdekében, hogy megértsük, mi az ELISA elemzés, mi ez és hogyan történik, meg kell ismerkednie a szakemberek által használt alapvető kifejezésekkel.

1. Ellenanyag- egy fehérje, amelyet az emberi immunrendszer sejtjei (B típusú limfociták) termelnek. Különleges reakcióval reagálnak idegen szer vagy anyag szervezetbe jutására. Az antitestek másik elnevezése az immunglobulinok, amelyek különböző osztályokba tartoznak: A, E, M, G. Tömegükben, reakciósebességükben, felezési idejükben és számos egyéb jellemzőjükben különböznek egymástól. Normális esetben az emberi vér főleg G osztályú immunglobulinokat tartalmaz, fertőzés esetén az A és M immunglobulinok mennyisége meredeken megnő.Az E immunglobulinok allergiás reakciókban vesznek részt.
2. Antigén- szerves eredetű és nagy molekulatömegű idegen anyag. Leggyakrabban kórokozókat vagy azok biológiailag aktív anyagait képviseli.
3. Az antigén-antitest komplex vagy immunkomplex a közvetlen kombináció idegen anyagés immunglobulin, amely immunreakció kialakulását eredményezi.

A módszer lényege és terjedelme

A betegekben gyakran felmerül a kérdés: ELISA elemzés, mi ez, hogyan történik és mire való? A módszerről érthető módon beszélhet, ha röviden ismerteti szakaszait.

Előkészületi szakasz. A laboratóriumi orvos egy speciális lemezt használ 96 lyukkal. Minden egyes lyuk felületére egy adott kórokozó antigénjét visszük fel.

1. szakasz. Vért vesznek, majd cseppenként felviszik a kútba. A kút reakciót indít el az antigén és a vérben lévő antitest között.

2. szakasz. A lyukban javában zajlik a reakció az immunkomplexek kialakulásával. Ennek eredményeként egy bizonyos színű anyag képződik. A szín intenzitása a páciens vérében lévő antitestek mennyiségétől függ az egyes kórokozók ellen.

3. szakasz. Az eredmény értékelése fotometriával. Erre a célra egy speciális készüléket, úgynevezett spektrofotométert használnak. A furatban lévő anyag és a kontrollminta sűrűségének összehasonlítására szolgál. Ezután a készülék matematikai elemzéssel eredményt generál.

Az ELISA eredményeinek értékelése és célja

Az eredmény értelmezése számos fontos árnyalattól függ:

1. A kút optikai sűrűsége.
2. A lyukakkal ellátott lemez gyártója (tesztrendszerek).
3. Laboratórium, amelyben a vizsgálatot elvégezték.

Tekintettel ezekre az árnyalatokra, soha ne hasonlítson össze két különböző tesztrendszerből vagy különböző laboratóriumokból származó eredményt.

Az ELISA analízist befolyásoló másik fontos szempont az úgynevezett antitest-aviditás. Ez a paraméter jellemzi az antigén mennyiségét és az antigén-antitest komplexben lévő kötés erősségét. Meghatározása az immunkomplex karbamiddal történő kezelésén alapul, a fehérjeszerkezetek feloldása érdekében. Ez lehetővé teszi az antigén és az antitest közötti gyenge kötések megsemmisítését, és csak az erősek meghagyását. Az aviditásvizsgálat jelentősége, hogy segítségével meghatározható a fertőzés időtartama. Ez az információ rendkívül fontos a terhes nők diagnózisának felállításához.

Az ELISA módszerrel végzett vérvizsgálat a következőket szolgálja:

1. Különféle kórokozó antigének felkutatására.
2. A hormonszintek tanulmányozására.
3. Autoimmun patológia jelenlétének vizsgálatára.
4. Markerek észlelésére onkológiai betegségek.

Az ELISA fajtái

Az ELISA elemzés a következő típusokat tartalmazza:

1. Közvetett.
2. Egyenes.
3. Kompetitív.
4. Blokkolás módszere.

De valójában ma már csak az ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) nevű módszert alkalmazzák. Az antigén-antitest komplex képződésének fent leírt reakcióján alapul, a lyuk felületének színváltozásával.

Maga a kvantitatív ELISA vérvizsgálat külön figyelmet érdemel. Ez nem egyfajta elemzés, hanem az eredmények értékelésének módja. Ennek köszönhetően kiszámítják az antitestek számát és meghatározzák osztályaikat. Az eredmény függ a minta optikai sűrűségétől, a tesztrendszertől, amelyen az ELISA analízist végezték, valamint a laboratóriumtól.

ELISA-val kimutatott betegségek

Az ELISA egy vérvizsgálat, amely számos különböző fertőző betegség kimutatására képes. Sőt, mind a vírusos, mind a vírusos fertőzéseket azonos pontossággal észlelik. bakteriális betegségek. Például immunkomplexek képzésével a következő betegségek kórokozóinak antigénjeinek jelenlétét lehet bizonyítani:

Ezenkívül az ELISA lehetővé teszi a következők kimutatását:

1. Rákmarkerek - TNF (tumor nekrózis faktor), PSA (prosztata-specifikus antigén), CEA (karcinoembrionális antigén), CA-125 (petefészektumor marker)
2. A terhességi hormon a hCG (humán koriongonadotropin).
3. Szabálysértések szaporító rendszer: a női és férfi reproduktív rendszer hormonjai.
4. A pajzsmirigy patológiája.

Fontos megemlíteni, hogy ma az ELISA-teszt a HIV-teszt a fő módja ennek a veszélyes betegségnek a diagnosztizálására.

Anyag ELISA-hoz és mintavételi technikához

Az ELISA elvégzéséhez éhgyomorra vért vesznek a betegből. Ezután a vérből szérumot nyernek, amelyet közvetlenül az elemzéshez használnak fel. Ezenkívül az ELISA-t agy-gerincvelői folyadékon (CSF), nyaki nyálkahártyán (cervix), magzatvízen, sőt üvegtest folyadékon (szemgolyó) is el lehet végezni.

Véradás előtt figyelmeztetik a beteget, hogy ne szedjen semmilyen gyógyszert, hanem antibiotikumos kezelést ill vírusellenes gyógyszerek Javasoljuk, hogy legalább két héttel a vérvétel előtt fejezze be.

Az eredmények beérkezésének és dekódolásának határideje

Az, hogy a laboratórium mennyi idő alatt érkezik meg a válasz, nem a munka sebességétől függ, hanem attól, hogy a betegség milyen stádiumban van, és milyen antitestek jelentek meg már a vérben. Például: az M immunglobulinok körülbelül 2 héttel a vér elemzése után jelennek meg, és azt jelentik, hogy a folyamat az elsődleges fertőzés stádiumában van, vagy a krónikus fertőzés súlyosbodása következett be. Ugyanakkor az elsődleges fertőzés során megjelennek az M és G osztályú antitestek. Sőt, ez utóbbi 4 hét után kimutatható.

Az IgA 2-3 hét múlva jelenik meg önmagában vagy M-mel együtt, azaz akut fertőzés, vagy G-vel együtt, ami krónikus folyamatot jelez.

Az antitestek vérben való megjelenésének ilyen eltérő időszakai arra kényszerítik a pácienst, hogy sokáig várjon az eredményre. Elfogadható, hogy az ELISA-teszt elvégzése után több mint egy hónapot várjon. Az orvos általi megfejtés és értelmezés is eltart egy bizonyos ideig.

A fertőző betegségekre használt standard diagnosztikai intézkedések listája tartalmazza az enzim immunoassay-t. Ha az ELISA pozitív szifiliszre mutat, ne essen azonnal pánikba.

Nézzük meg közelebbről ennek a kutatási technikának a jellemzőit és a különböző betegkategóriákban kapott eredmények értelmezésének elveit.

Az enzimes immunoassay az egyik leggyakoribb módszer a fertőző betegségek diagnosztizálására. A treponemalis tesztek kategóriájába tartozik, azaz segítségével megállapítható a szifilisz kórokozója - treponema pallidum - a beteg szervezetében.

ELISA módszerrel a szifilisz kimutatása a treponema elleni antitestek kimutatásával történik. A beteg vérében találhatók, típusuk és mennyiségük a betegség stádiumától és formájától függ, ami lehetővé teszi, hogy fontos információkat szerezzünk az emberi egészség aktuális állapotáról.

Előnyök és hátrányok

Az ELISA-t nagyon gyakran írják fel szifilisz vagy egyéb gyanú esetén fertőző betegségek. Ez annak köszönhető, hogy az elemzés lehetővé teszi a betegség pontos típusának és stádiumának azonosítását, megbízhatósága magas szinten marad - a hiba valószínűsége több vizsgálat eredménye alapján mindössze 1%, az elsődleges ELISA. körülbelül 90%-os pontossággal rendelkezik.

A kiváló minőségű reagensek és a modern berendezések használata lehetővé teszi a mutatók pontosságának maximalizálását.

Általánosságban elmondható, hogy a módszer előnyei a következők:

1. Az eredmények nagy pontossága. Nagyon kicsi annak a valószínűsége, hogy hamis adatokat kapjanak.
2. Az emberi befolyásoló tényező minimalizálása. Az ELISA elvégzésére szolgáló modern berendezés a folyamat automatizálása miatt kiküszöböli az emberi befolyást a vizsgálat eredményeire.
3. Specifikus antitestek azonosítása. Az egyik típusú antigéneket nem lehet összetéveszteni másokkal, ezért az elemzés egy adott diagnózis pontos eredményét mutatja.
4. A normától való legkisebb eltérések rögzítése. A kóros ágensek legkisebb koncentrációja sem marad észrevétlen.

Nem szabad megfeledkeznünk ennek a módszernek a gyengeségeiről. Az ELISA-nak a következő hátrányai vannak:

1. Magas ár. A magas költség számos tényezőnek köszönhető, különösen a jó felszerelés, a jó minőségű reagensek és a megfelelő képzettségű szakemberek iránti igény.
2. Az előzetes diagnózis szükségessége. Tudnia kell, hogy mely antigéneket kell keresni, mivel további adatok nélkül lehetetlen pontos diagnózist felállítani.
3. A hamis pozitív eredmény valószínűsége. Bizonyos testi állapotok és egyéb tényezők torzíthatják a végső adatokat.

Használati javallatok

Az orvos enzim-immunoassay-t írhat elő nemcsak a szifilisz, hanem számos más fertőző betegség diagnosztizálására is.

Ha közvetlenül figyelembe vesszük a helyzetet a treponema fertőzéssel, a vizsgálat oka lehet:

• a betegség külső tüneteinek megjelenése (kankrék, szifilitikus kiütések, gumik stb.);
• az immunitás jelentős csökkenése;
• szifilisz észlelése vagy gyanúja szexuális partnernél, szeretteiknél és családtagoknál;
• pozitív reakció más tesztek során;
• a szifiliszhez társuló egyéb betegségek azonosítása;
• egy személy személyes kívánsága a vizsgálatra.

Végrehajtási módszerek

Az ELISA többféleképpen is elvégezhető. Minden egyes esetben a legmegfelelőbb opció kerül kiválasztásra.

Először is, a módszerek a következőkre oszthatók:

1. Minőségi. A páciens testében fertőzés vagy vírus jelenlétét észlelik.
2. Mennyiségi. Meghatározza a patogén ágens elleni antitestek koncentrációját az emberi szervezetben, ami jelzi a betegség kialakulásának stádiumát és intenzitását.

Létezik az ELISA elvégzésének módszereinek osztályozása is, amely a szükséges reakció reprodukálásának elvén alapul.

3 lehetőség van:

1. Egyenes. A jelölt antitesteket a mellékelt vérmintákba fecskendezik.
2. Közvetett antigénekkel. A szorbeált antigéneket először egy ELISA-vizsgálatra szánt polisztirol lemez sejtjeibe helyezik. Ezután vírusos antitesteket adnak hozzájuk, ami az eredmények további értékeléséhez szükséges immunkomplexek képződését provokálja.
3. Közvetett antitestekkel. Ezt a módszert gyakran használják szexuális úton terjedő betegségek esetén. Ez magában foglalja az antitestek előzetes felszívódását, csak ezután adják hozzá az antigéneket a tablettához.

Anyaggyűjtési szabályok

A megbízhatatlan eredmények fogadásának kockázatának csökkentése érdekében helyesen kell vért adni az elemzéshez.

Az ELISA teszt elvégzése előtt meg kell felelnie néhány korlátozásnak:

• kerülje az intenzív fizikai és érzelmi stresszt;
• hagyja abba a dohányzást és az alkoholfogyasztást legalább 1-3 napig;
• néhány napig át kell állnia a megfelelő táplálkozásra;
• A nőknek tanácsos ellenőrizni a fázist menstruációs ciklus, mivel a hormonok torzíthatják az eredményeket;
• az utolsó étkezésnek 8-10 órával a véradás előtt kell lennie;
• 10 nappal azelőtt, hogy olyan gyógyszereket szedne, amelyek befolyásolhatják a vizsgálat eredményeit.

Az ELISA-hoz a vénás vért az ulnaris vénából veszik, reggel éhgyomorra kell leadni. Általában a vénás vérvételre való felkészülésre vonatkozó szabványos szabályok érvényesek. Attól függően, hogy melyik betegséget vizsgálják, további követelményeket írhatnak elő a beteg előzetes felkészítésére vonatkozóan.

Módszertan

Az ELISA végrehajtására vonatkozó utasítások meglehetősen egyszerűek:

1. A beteg vérét vénából veszik.
2. A kivett anyagot speciális finomhálós raklapon készítik elő és mintákra osztják.
3. Az antigéneket a választott módszer szerint összekeverik az antitestekkel.
4. A reakciót értékeljük. A mintákat összehasonlítják a kontroll mintákkal, és az eredményeket minőségileg és mennyiségileg értékelik.
5. Az adatokat egy speciális táblázatba kell beírni, amelyhez kvantitatív indikátorok vannak csatolva (összes antitest).
6. Az eredményeket a kezelőorvos értelmezi. Szükség esetén megfelelő kezelést írnak elő.

A vizsgálat után a betegnek egy dokumentumot adnak át az eredményekről. Úgy néz ki, mint egy táblázat, amelyben a megfelelő szimbólumok az egyes immunglobulintípusokkal szemben a fertőző betegségek nevének metszéspontjában találhatók.

Dekódolás

Csak egy szakember tudja helyesen megfejteni a vizsgálati eredményeket. Nehéz önállóan kitalálni, hogy mit jelent például az ELISA eredmény k = 1 4. A szifilisz is előfordulhat különböző formában, ami a végső adatokban is megmutatkozik.

Az eredmények háromféle immunglobulinra utalnak:

1. IgM. Lehetővé teszi a szifilisz fertőzés időtartamának meghatározását. A pozitív eredmény a betegség súlyosbodását jelzi. Hiányuk krónikus patológiák remisszióját vagy a betegség látens formáit jelezheti.
2. IgA. Olyan betegséget jelez, amely több mint egy hónap telt el a fertőzés óta. Ez a betegség akut fázisának jele is, mind a közönséges, mind az előrehaladott krónikus patológiákban.
3. IgG. A betegség csúcsidőszakának, vagyis súlyosbodásának a jele. Szifilisz esetén a kezelés után egy idő után pozitív reakció jelentkezik. Bizonyos betegségek esetén ez a kialakult immunitás jele lehet.

Ezeket az anyagokat a szervezet bizonyos sorrendben állítja elő, ami a betegség további jele. A kvalitatív vizsgálatok csak az immunglobulinok jelenlétét határozzák meg az egyes típusok vérében.

Ez az elemzésbe bevont anyagok színének megváltozásában mutatkozik meg. Mennyiségi mutatók segédletek, pontosabban írják le a helyzetet. Az antigének és antitestek aránya a betegség súlyosságát és a szervezet válaszreakciójának intenzitását jelzi.

Mit kell tenni

Ha a beteg valóban szifiliszben szenved, akkor abszolút mindig pozitív ELISA-t észlelnek; lehetetlen nem észrevenni a treponemek jelenlétét egy ilyen vizsgálat során. Ne essen kétségbe, a betegség nagyon jól kezelhető, különösen a kezdeti szakaszban.

Mi a teendő, ha a teszt eredménye pozitív:

• az orvos jelzése szerint további vizsgálatokat kell végezni;
• végezzen el egy antibiotikum-terápiát a választott kezelési rend szerint;
• összpontosítsa erőfeszítéseit az immunrendszer erősítésére;
• tájékoztassa szexuális partnerét a betegségről;
• a jövőben rendszeresen végezzen megelőző diagnosztikát a rendelőben történő regisztrációig (pozitív vizsgálati eredmény hiányában 5 év elteltével).

Nem kell halogatni a betegszabadság felvételét, és félni az eredmények nyilvánosságra hozatalától. A diagnózis titkosított és titokban marad, csak abban az esetben kell a rokonokat és a szexuális partnereket tájékoztatni a problémáról, hogy átessék a szükséges vizsgálatokat.

Hamis pozitív eredmény és okai

Néha más tesztek és ELISA eredményeit hamis pozitívként rögzítik a szifiliszre. Ezért ajánlatos 2-3 segédmódszert elvégezni, és bizonyos idő elteltével megismételni az enzim immunoassayt.

Az ilyen pontatlanságok ritkák, főként a következő tényezőkre vezethetők vissza:

• terhesség;
• krónikus betegségek;
• legutóbbi oltás;
• sérülések.

A hamis pozitív eredményeket akut és krónikusra osztják, az azokat kiváltó tényező természetétől függően.

A főbbeket a táblázat tartalmazza:

Cím és fotó	Rövid leírás
Terhesség	A magzat és az apa genetikai anyaga idegen ágensnek minősül.
Akut forma
Fertőzés	A betegség leküzdésére immunglobulinokat állítanak elő.
Sérülés	A szervezet gyulladásos folyamattal reagál, és ezzel egyidejűleg fertőzés is előfordulhat.
Mámor	Akkor fordul elő, ha mérgező anyagokkal mérgezik vagy bizonyos kórokozó mikroorganizmusok behatolnak.
Szívroham	Az akut szívproblémák jelentős terhet rónak a szervezetre, és számos deszenzibilizáló reakciót váltanak ki.
Oltás	A vakcina bevezetése befolyásolja az immunglobulinok termelését.
Krónikus forma
Tuberkulózis	A tuberkulózis előrehaladott formája hasonló reakciót mutat.
A máj patológiái	Az egész szervezet működése megzavarodik.
Autoimmun betegség	Ilyen kudarcok esetén az immunglobulinok termelése alaptalan lehet az antitestek jelenléte miatt.
Kötőszöveti betegségek	Ezek túlnyomórészt genetikai patológiák, és néha „összetévesztik” a vizsgálatok eredményeit.
Az életkorral összefüggő változások	Idős embereknél az immunrendszer hibásan működik, és számos krónikus betegség fordul elő.

Ha ilyen egészségügyi problémái vannak, a szifilisz teszt pozitív eredményt mutathat, de ez csak annak a következménye, hogy a szervezet fehérjéket termel a betegség leküzdésére. Az ELISA azonban antigénként ismeri fel őket.

Egy egészséges, legfeljebb másfél éves gyermeknél hamis pozitív ELISA eredmények figyelhetők meg, ha a nő terhesség alatt szifiliszben fertőződött meg. E kor előtt a vérnek még nem volt ideje teljesen megújulni, így az anyai antitestek jelen lehetnek benne. Kivételt képez az IgM immunglobulinok kimutatása.

Az enzim immunoassay jellemzőiről és végrehajtásának módszertanáról további információkat találhat, ha megtekinti a cikkben található videót.