HIV感染を診断するための主な方法。 HIV感染を診断する最新の方法 HIV感染の最終診断を確立することができます

HIV感染のタイムリーな診断は、早期治療が病気のさらなる進行を大きく決定し、患者の寿命を延ばす可能性があるため、非常に重要な手段になります。 近年、これを特定する上で大きな進歩がありました 恐ろしい病気: 古いテスト システムはより高度なシステムに置き換えられ、検査方法はより利用しやすくなり、その精度は大幅に向上しています。

この記事では、HIV感染を診断するための最新の方法について説明します。これは、この問題をタイムリーに治療し、患者の通常の生活の質を維持するために知っておくと役立ちます。

HIVの診断方法

ロシアでは、HIV感染の診断のために、2つのレベルを含む標準的な手順が実行されます。

  • ELISA試験システム(スクリーニング分析);
  • 免疫ブロッティング (IB)。

他の診断方法も使用できます。

  • エクスプレステスト。

ELISA試験システム

診断の最初の段階では、HIV 感染を検出するためにスクリーニング検査 (ELISA) が使用されます。これは、感染に反応して体内で生成された特定の抗体を捕捉する実験室で作成された HIV タンパク質に基づいています。 テストシステムの試薬(酵素)との相互作用の後、インジケーターの色が変わります。 さらに、これらの色の変化は、実行された分析の結果を決定する特別な装置で処理されます。

このような ELISA 検査は、HIV 感染の導入後数週間以内に結果を示すことができます。 この分析は、ウイルスの存在を決定するものではありませんが、それに対する抗体の産生を検出します。 人体では、感染後 2 週間後に HIV に対する抗体の産生が始まることがありますが、ほとんどの人では 3 ~ 6 週間後に産生されます。

感度の異なる 4 世代の ELISA テストがあります。 近年、合成ペプチドまたは組換えタンパク質に基づいており、より高い特異性と精度を備えたIII世代およびIV世代のテストシステムがより頻繁に使用されています。 それらは、HIV 感染の診断、HIV 感染率の監視、および献血検査時の安全性の確保に使用できます。 III および IV 世代の ELISA テスト システムの精度は 93 ~ 99% です (より感度が高いのは、西ヨーロッパで製造されたテストです - 99%)。

ELISA検査を行うために、患者の静脈から5mlの血液を採取します。 最後の食事と分析の間には、少なくとも8時間は必要です(原則として、朝の空腹時に実行されます)。 このような検査は、感染の疑いがあってから 3 週間以内に行うことをお勧めします (たとえば、新しい性的パートナーとの無防備な性交の後)。

ELISA テストの結果は、2 ~ 10 日後に得られます。

  • 否定的な結果: HIV 感染がないことを示し、専門家への紹介を必要としません。
  • 偽陰性の結果: 感染の初期段階 (最大 3 週間)、重度の免疫抑制を伴う AIDS の後期段階、および不適切な血液調製で観察される可能性があります。
  • 偽陽性の結果: 一部の疾患や不適切な血液調製の場合に観察されることがあります。
  • 陽性の結果: HIV 感染による感染を示し、IB と AIDS センターの専門家への患者の紹介が必要です。

ELISA 検査で偽陽性の結果が得られるのはなぜですか?

HIV の ELISA 検査の偽陽性結果は、血液の不適切な処理、またはそのような状態や病気の患者で観察できます。

  • 多発性骨髄腫;
  • 感染症、エプスタイン-バーウイルスによって引き起こされます。
  • 後の状態;
  • 自己免疫疾患;
  • 妊娠を背景に;
  • ワクチン接種後の様子。

上記の理由により、非特異的な交差反応性抗体が血液中に存在する可能性がありますが、その産生は HIV 感染によって引き起こされたものではありません。

近年、より感度の高いペプチドと組換えタンパク質を含む III 世代および IV 世代のテスト システムの使用により、偽陽性結果の頻度が大幅に減少しました (これらは in vitro 遺伝子工学を使用して合成されます)。 このような ELISA テストの使用後、偽陽性の結果の頻度は大幅に減少し、約 0.02 ~ 0.5% になりました。

偽陽性の結果は、人が HIV に感染していることを意味するものではありません。 このような場合、WHO は別の ELISA 検査を推奨しています (必須の IV 生成)。

患者の血液は、「反復」と記された参照または調停検査室に送られ、IV 世代 ELISA 検査システムで検査されます。 新しい分析の結果が陰性の場合、最初の結果は誤り (偽陽性) として認識され、IB は実行されません。 2回目の検査で結果が陽性または疑わしい場合、患者はHIV感染を確認または否定するために4〜6週間でIBを受ける必要があります.

免疫ブロッティング

HIV 感染の確定診断は、陽性の免疫ブロッティング (IB) 結果が得られた後にのみ行うことができます。 その実装のために、ウイルスタンパク質が適用されるニトロセルロースストリップが使用されます。

IB の採血は静脈から行います。 次に、特別な処理が行われ、その血清に含まれるタンパク質が、電荷と分子量に応じて特別なゲルで分離されます(操作は、電場の影響下で特別な装置で行われます)。 ニトロセルロースストリップが血清ゲルに適用され、ブロッティング(「ブロッティング」)が特別なチャンバーで実行されます。 ストリップが処理され、使用される材料に HIV に対する抗体が含まれている場合、それらは IB の抗原バンドに結合し、線として表示されます。

IB は、次の場合に陽性と見なされます。

  • アメリカの CDC 基準によると、ストリップには 2 つまたは 3 つのライン gp41、p24、gp120 / gp160 があります。
  • アメリカの FDA 基準によると、ストリップには p24、p31 の 2 つのラインと、gp41 または gp120 / gp160 のラインがあります。

症例の 99.9% で、陽性の IB 結果は HIV 感染を示します。

行がない場合 - IB は負です。

gp160、gp120、gp41 で行を識別する場合、IB は疑わしいです。 このような結果は、次の場合に検出できます。

  • 腫瘍性疾患;
  • 妊娠;
  • 頻繁な輸血。

このような場合は、他社のキットを使用して 2 回目の検査を行うことをお勧めします。 IBを追加しても結果が疑わしい場合は、6か月間のフォローアップが必要です(IBは3か月ごとに実行されます)。

ポリメラーゼ連鎖反応

PCR検査では、ウイルスのRNAを検出できます。 その感度は非常に高く、感染後 10 日という早い時期に HIV 感染を検出できます。 PCR は感度が高く、他の感染症に対する抗体にも反応する可能性があるため、場合によっては偽陽性の結果が得られることがあります。

この診断技術は高価であり、特別な機器と高度な資格を持つ専門家が必要です。 これらの理由により、母集団の大量検査中に実施することはできません。

PCR は次のような場合に使用されます。

  • HIV に感染した母親から生まれた新生児の HIV を検出する。
  • 「ウィンドウ期間」または疑わしい IB の場合に HIV を検出する。
  • 血液中のHIV濃度を制御する;
  • ドナー血液の研究のため。

PCR検査だけではHIVの診断はできませんが、 追加の方法紛争を解決するための診断。


エクスプレス メソッド

HIV 診断の革新の 1 つは迅速な検査になり、その結果は 10 ~ 15 分で評価できます。 最も効率的で正確な結果は、キャピラリー フローの原理に基づくイムノクロマトグラフィー テストで得られます。 それらは、血液またはその他の試験液(唾液、尿)が適用される特別なストリップです。 HIV に対する抗体が存在する場合、10 ~ 15 分後に、テストに着色されたコントロール ストリップが表示されます - 陽性の結果です。 結果が陰性の場合は、コントロール ラインのみが表示されます。

ELISA テストと同様に、迅速なテスト結果は IB 分析によって確認する必要があります。 そうして初めて、HIV感染の診断を下すことができます。

ホームテスト用のエクスプレスキットがあります。 OraSure Technologies1 (米国) の検査は FDA の承認を受けており、処方箋なしで入手でき、HIV の検出に使用できます。 検査後、陽性の結果が得られた場合、患者は検査を受けることが推奨されます。 専門センター診断を確認します。

家庭用の残りのテストはまだ FDA によって承認されておらず、その結果は非常に疑わしいものになる可能性があります。

迅速検査は IV 世代 ELISA 検査よりも精度が劣るという事実にもかかわらず、集団の追加検査に広く使用されています。

ポリクリニック、中央地域病院、または専門の AIDS センターで、HIV 感染の検査を受けることができます。 ロシアの領土では、彼らは完全に秘密裏に、または匿名で保持されています。 各患者は、分析の前後に医学的または心理的なアドバイスを受けることができます。 HIV検査の費用は商業医療機関でのみ支払う必要があり、公立の診療所や病院では無料で実施されます。

どのようにして HIV に感染するか、および感染する可能性についてどのような神話が存在するかについての情報については、以下をお読みください。

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HIV感染症の臨床および検査診断次の 3 つの方向があります。

  1. HIV感染の事実の確定、HIV感染の診断。
  2. 疾患の臨床経過の段階を決定し、二次疾患を特定します。
  3. 疾患の臨床経過の進行の予後、抗レトロウイルス薬の治療効果および副作用の実験室モニタリング。

1. HIV感染の確立、HIV感染の診断

HIV感染を判断するために、次の特定の指標が使用されます:HIVに対する抗体、HIV抗原、HIV RNA、およびプロウイルスDNA。 HIVに対する抗体は、本質的に一種のELISAである酵素免疫測定法(ELISA)または免疫ブロッティングによって決定されます。 HIVの抗原(タンパク質)はELISAによって決定されます。 ポリメラーゼ連鎖反応 (PNR) と bDNA の分子遺伝学的手法の助けを借りて、HIV RNA とプロウイルス DNA を決定することが可能です。 核酸と特定の DNA プローブとのハイブリダイゼーションの追加の方法を使用すると、PCR 中に得られた DNA 配列の特異性を確認できます。 PCR の感度 - 5000 個の細胞のうちの 1 個でのウイルス遺伝子の検出。

一次感染時には、感染者の血液中の HIV マーカーの次のダイナミクスが観察されます。 最初の 1 か月で、複製プロセスの活性化の結果として、ウイルス負荷 (血漿中の HIV RNA 含有量) が急激に増加し、その後、ウイルスの拡散と血液およびリンパ液中の標的細胞の大量感染により、ノード、プロウイルス DNA を決定することが可能になります。 最も重要な診断上の価値は、標的細胞のゲノムに組み込まれたプロウイルス DNA の検出の事実です。

ウイルス負荷は、感染細胞における複製プロセスの強度を反映しています。 一次感染の期間中、異なる HIV サブタイプに感染するとウイルス量のレベルは異なりますが、その変化のダイナミクスはほぼ同じです。 したがって、サブタイプBに感染した場合、たとえば、感染後の最初の1か月でウイルス負荷の値が700コピー/ mlの場合、2か月目では600に減少し、3か月目では100に減少します。 4日 - 50コピー/ mlまで。 このようなダイナミクスは、血中のHIVに対する特異的抗体の含有量の増加を背景に観察されます。 HIV 感染患者の血中単核球中のプロウイルス DNA の含有量は、最初の 6 か月間は相対的に一定であり、一部のサブタイプではわずかに変動するという特徴があります。 したがって、RNA と DNA の負荷は同じではありません。

潜伏段階の間、しばらくの間、既存の検査法で測定するのに十分な量の HIV に対する特異的抗体は形成されません。 抗体が検出される前に、複製プロセスを抑制する Nef タンパク質と構造タンパク質 p24 の血液中の出現が非常に短時間観察されます。 p24 抗原は、感染後すでに 1 ~ 2 週間で酵素免疫測定法によって血液中に検出され、8 週目まで測定できますが、その後、その含有量は急激に減少します。 さらに、HIV感染の臨床経過において、血液中のp24タンパク質含有量の二次上昇が認められる。 それはエイズの形成の時期に当たります。 血中の遊離(抗体に結合していない)p24 コアタンパク質の消失と、HIV タンパク質に対する特異的抗体の出現は、セロコンバージョンの開始を示します(図 9.6)。

ウイルス血症および抗原血症は、IgM クラスの特異的抗体 (抗 p24、抗 gp41、抗 gp120、抗 gp160) の形成を引き起こします。 p24タンパク質に対するIgMおよびIgGクラスの遊離抗体は、2週目から出現する可能性があり、その含有量は2〜4週間以内に増加し、特定のレベルに達し、数か月(IgM)および数年(IgG)残ります(図9.7 )。

HIV p24、gp41、gp120、gp160の構造タンパク質に対するIgGクラスの高レベルの特異的抗体が末梢血に記録されている場合、完全なセロコンバージョンの出現は、HIV感染の診断を非常に容易にします。 HIVに対する抗体は、感染後3か月以内に感染した人の90〜95%、感染の瞬間から3〜6か月の間に5〜9%、後日0.5〜1%に現れます。

HIV に対する抗体が最後に現れるという事実にもかかわらず、これまでの主な検査診断指標は、ELISA およびイムノブロッティングによる特異的抗体の検出です。

表 9.2 に示すデータ [見せる] と 9.3 [見せる] 、免疫ブロッティングの感度を超える、HIVに対する抗体の検出における最新のELISAテストシステムの高感度を明確に示しています。 場合によっては、ELISA で一次陽性の結果が得られた場合でも、2 ~ 3 週間後に免疫ブロッティングで確認できることがあります。

表 9.3. セロコンバージョンモニタリングの例 (H. Fleury, 2000 による)
定義の瞬間 p24 抗原、pg/ml HIVタンパク質に対する抗体
ELISA、OD arr/OD cr ** イムノブロッティング
HIV
デュオ
ジェネ画面 ユニフォーム
患者1
主に17 1,24 1未満1未満*
4日後67 1,36 1,85 1未満-
7 日後* 2,33 6,84 1未満-
2日後* 6,77 15,0 4,8 gp160
患者 2
主に400 13 1未満1未満-
5日後450 18 2,11 1未満-
10日後* 33 12,19 2,9 gp160
注: * - 未定
** - 検査した血清サンプルの光学密度と光学密度の臨界 (しきい値) 値の比

世界有数の企業のイムノブロッティング検査システムを使用してHIV感染症(HIV感染者)の患者を検査すると、gp160およびp24/25に対する抗体はすべてのケースで検出され、他のタンパク質に対する抗体は38.8〜93.3%のケースで検出されます(表1) 9.4 [見せる] ).

HIV 感染患者の抗体を検出する際の困難は、大量のウイルス血症および抗原血症の期間中に発生する可能性があります。これは、血液中に存在する特定の抗体がウイルス粒子と関連しており、複製プロセスが新しい抗ウイルス抗体の産生よりも進んでいる場合です。 この状況は、感染プロセス中に行き来する可能性があります。

初期に免疫系が弱まっている患者では、ウイルス血症と抗原血症が早期に現れ、病気が治るまで高レベルのままです。 そのような患者では、2つの理由により、HIVに対する遊離抗体の含有量が少なくなります-Bリンパ球による抗体の産生が不十分であり、ビリオンと可溶性HIVタンパク質による抗体の結合が不十分であるため、感染を判断するには、感度が向上したシステムをテストしますまたは、免疫複合体からの抗体放出の段階を含む分析方法の変更が必要です。

ほとんどの場合、これらの理由によるHIVに対する抗体の含有量の減少は、 終末期血清中の HIV に対する抗体が、エンザイムイムノアッセイまたはイムノブロッティング (ウエスタンブロット) によって捕捉されない場合があります。 HIVに対する特異的抗体の出現に加えて、最初の4ヶ月の免疫反応は、血液中の感染したCD4 +の含有量の減少とCD8 +細胞の増加によって特徴付けられます。 さらに、CD4 および CD8 受容体を持つ細胞の内容物は安定し、しばらくの間変化しません。 CD8リンパ球の含有量の増加は保護反応です。 細胞依存性細胞傷害は、HPV 感染細胞の破壊を目的とした CD8+ リンパ球によって実現されます。 最初に、細胞傷害性リンパ球 (CTL) はウイルスの Nef 調節タンパク質に応答します。これは、最初の数か月で HIV 感染者の血漿中のウイルス (RNA) 負荷を減らすのに重要な役割を果たします。 次に、CTL応答が他のものに対して形成されます。 HIVの構造タンパク質。その結果、感染後12か月で、cptotoxic効果が大幅に増加します。

HIV感染の検査室診断のためのスキーム

HIV感染の特定のマーカーの特定のダイナミクスを考慮して、実際には、成人の検査室診断については次のスキームに従うことをお勧めします(図9.8-9.10)。

これらのスキームは、HIV 感染の一次検査診断の 3 つの主な段階を反映しています。

  1. ふるい分け。
  2. 参照。
  3. エキスパート。

検査室診断のいくつかの段階の必要性は、主に経済的な考慮事項によるものです。 したがって、たとえば、免疫ブロッティングによる国内のテストシステムを使用して1つの専門家による研究を実施するコストは最大40米ドルであり、スクリーニング(ELISAによる)は約0.2、つまり比率は1:200です。

第 1 段階 (図 9.8) では、HIV-1 と HIV-2 の両方のウイルスに対する抗体を検出するように設計された 1 つの ELISA テスト システムを使用して、被験者の HIV に対する抗体をテストします。

提案された試験システムの製造業者は、ウイルスライセート、組換えタンパク質、合成ペプチドを抗原の基礎として使用します。 リストされている HIV 抗原決定基の保因者のそれぞれには、独自の長所と短所があります。 したがって、ほぼ同じコストのテスト システムを選択する場合は、感度が最も高い (できれば 100%) キットを選択する必要があります。 同じコストと感度のテストシステムの中で、最大の特異性を持つものにこだわることをお勧めします.

ウイルス ライセートに基づいて、HIV 感染の実験室診断のための最初のテスト システムが作成されました。 1980 年代、このようなテスト システムは、100% 未満の感度と低い特異性を特徴とし、多数 (最大 60%) の偽陽性結果によって明らかにされました。

リンパ球の培養におけるビリオンの形成中に、そのエンベロープが外膜から作成され、したがってクラス I および II の主要組織適合性複合体の抗原が含まれます。 この状況は、患者の血液中に組織適合同種抗原に対する抗体が存在する場合に偽陽性反応を引き起こします。

その後、ウイルスを取得するために、マクロファージの培養を使用することが提案されました。マクロファージでは、ウイルス粒子は、細胞の外膜からではなく、小胞体の膜から出芽することによって主に細胞内で形成されます。 このテクノロジーにより、偽陽性の結果の数が減少しました。

酵素イムノアッセイは、最も重要な特性である感度と特異性という点で最高のものの 1 つとして認識されています。組み換えタンパク質を使用しています。

テストシステムの感度は、キットの他のコンポーネントの特性にも依存します。 したがって、IgG クラスだけでなく IgM および IgA の抗体も認識するコンジュゲートを使用するテスト システムは、セロコンバージョンの初期段階を検出することを可能にします。 抗ウイルス抗体と p24 抗原の両方を同時に測定できる検査システムを使用することは有望と思われます。これにより、HIV 感染の検査診断がより早期に行われます。

最初の陽性結果は、同じテスト システムでサンプルを再テストすることによって再確認する必要がありますが、できれば別のバッチで、別の検査助手が行う必要があります。 2回目の検査で否定的な結果が得られた場合、3回目の検査が行われます。

陽性結果を確認した後、再度血液を採取し、一次抗体として HIV に対する抗体を検査することが望ましいです。 採血を繰り返すことで、不正確なチューブのラベル付けや照会フォームへの記入によるエラーを防ぐことができます。

スクリーニング段階で陽性の血清は、2 つまたは 3 つの非常に特異的な ELISA テスト システムを使用して実行される参照研究のために送られます。 2 つの肯定的な結果の場合は、免疫ブロッティングによる専門家の研究が行われます。

HIV-1 および HIV-2 に対する特異的抗体を区別するために使用できるリファレンス診断での ELISA テスト システムの使用は、さらなる作業を容易にし、適切なイムノブロッティング (HIV- 1 または HIV-2) 。

HIV 感染に関する研究所の専門家の意見は、ウエスタンブロットの陽性結果に基づいてのみ発行されます。 専門家による診断を行う場合、1990 年に WHO の専門家グループによって提案された HIV の遺伝子および遺伝子産物の命名法を使用する必要があります (表 9.5 [見せる] ).

免疫ブロットのバンドの特異性は、実験サンプルの研究と並行して実施される対照血清(陽性および陰性)の研究の結果、および指定された免疫ブロットサンプルを使用して、非常に注意深く慎重に評価する必要があります。 HIV タンパク質 (メーカーがテスト システムに添付)。 得られた結果の解釈は、試験システムに付属の説明書に従って行う必要があります。 原則として、陽性の基準は、env遺伝子によってコードされる2つのタンパク質(前駆体、外側または膜貫通)に対する抗体の必須の存在、および他の2つの構造HIV遺伝子 - gagおよびpol(表 9.6 [見せる] ).

表 9.6. HIV-1 および HIV-2 の免疫ブロット結果の解釈基準 (WHO、1990 年)
結果 HIV-1 HIV-2
ポジティブ
+/- 偏波帯
+/- ギャグ ストライプ
2 レーン env (前駆体、外側 gp または膜貫通 gp)
+/- 偏波帯
+/- ギャグ ストライプ
ネガティブHIV-1 特異的バンドの欠如HIV-2 特異的バンドなし
不確か ポジティブまたはネガティブと見なされないその他のプロファイル

疑わしい結果が得られた場合は、イムノブロッティングの結果を最終的に明確にするための推奨事項のリストを使用する必要があります (表 9.7 [見せる] ).

表 9.7. 不確定なイムノブロッティングの結果を明確にするための推奨事項 (WHO、1990 年)
HIVタンパク質に対応するバンドの存在 結果の解釈、さらなるアクション
HIV-1
p17のみ
p24 と gp160 のみこのような異常な画像は、セロコンバージョンの開始時に発生する可能性があります。 サンプルはすぐに再テストする必要があります。 同じプロファイルを取得する場合、最初のサンプルを採取してから 2 週間後に、免疫ブロッティングでテストするための 2 番目のサンプルを採取する必要があります。
その他のプロファイルこれらのプロファイル (env なしの gag および/または pol) は、セロコンバージョンまたは非特異的反応を示している可能性があります。
HIV-2
p16のみネガティブに分類でき、追加の定義は必要ありません
ギャグ/ポールの有無にかかわらずレーン環境異なるバッチの試薬を使用して、同じサンプルを再テストする必要があります。
p24 または gp140 のみこの異常なプロファイルは、セロコンバージョンの初期に発生する可能性があります。 サンプルはすぐに再テストする必要があります。 同じプロファイルを取得する場合、最初のサンプルを採取してから 2 週間後に、免疫ブロッティングでテストするために 2 番目のサンプルを採取する必要があります。
その他のプロファイルこれらのプロファイル (env なしの gag および/または pol) は、セロコンバージョンまたは非特異的反応を示している可能性があります。

AIDSの予防と管理のためのロシア科学および方法論センターの推奨によると、他の特定のHIVに対する抗体と組み合わせて、タンパク質gp41、gp120、gp160の少なくとも1つに対する抗体の存在下で肯定的な結果が考慮されます- 1つのタンパク質またはそれらなし。 これらの推奨事項は、ウイルスエンベロープタンパク質の1つのみに対する抗体がしばしば検出された院内病巣からの子供からの血清での経験に基づいています.

最初に検査された ELISA で血清陽性の患者の主要部分は、持続性全身性リンパ節腫脹 (PGL) の段階または無症候性段階に属します。 したがって、免疫ブロット (HIV タンパク質が固定化されているニトロセルロース ストリップ) では、通常、次の HIV-1 に対する抗体の組み合わせが決定されます。 p24 コアタンパク質 (gag 遺伝子によってコードされるタンパク質ヌクレオキャプシド) および p31/34 (pol 遺伝子によってコードされるエンドヌクレアーゼ)。

gag および/または pol タンパク質のみによる陽性反応は、セロコンバージョンの初期段階で発生する可能性があり、HIV-2 または非特異的反応によって引き起こされる感染も示します。

疑わしい結果が得られた場合、さまざまな方法論的手法を使用して HIV 感染の事実を明らかにすることができます。

技術的能力(診断キットと試薬の入手可能性、特別な機器を備えた機器、および担当者のトレーニング)に応じて、専門の検査室が追加の診断研究を実施します(図9.10)。

場合によっては、分子遺伝学的手法を使用して、血清、血液リンパ球、またはリンパ節穿刺における HIV の遺伝子配列を決定することをお勧めします。 PCR によって得られた DNA 配列の特異性の検証は、核酸と特異的な DNA プローブとのハイブリダイゼーションによって行うことができます。

放射性免疫沈降 (RIP) および間接免疫蛍光 (IFI) 法も、免疫ブロットの結果が疑わしい血清の最終検証に使用できます。

定性的または定量的方法による血漿中の HIV RNA の検出は、HIV 感染の診断には重要ではありません。 このような結果は、最初に疑わしいまたは否定的な反応を受け取ってから 2 ~ 4 か月後に、イムノブロッティングなどの標準的な方法で確認する必要があります。

細胞培養における HIV の分離は究極の真実です。 ただし、この方法は複雑で費用がかかり、特別な設備を備えた研究所でのみ実行されます。

血液中のCD4 +細胞の含有量は非特異的な指標ですが、物議を醸すケース(ELISA「+」、免疫ブロット「-」、HIV感染/ AIDSの臨床的徴候の存在)では、ガイドラインとして使用できます専門家の決定を下すため。 研究所がイムノブロッティングのみを実行できる場合は、表 1 に示す推奨事項に従う必要があります。 9.7および図中。 9.9.

p17(HIV-1)またはp16(HIV-2)に対する抗体のみが検出された場合を除き、血清が疑わしい(不確定な)結果を専門家の検査で示した人は、6か月以内(3か月後)に再検査する必要があります。 真のHIV感染の場合、3〜6か月後、抗体のスペクトルに「陽性」の傾向が観察されます-ウイルスの他のタンパク質に対する抗体の追加の形成。 スプリアス反応は、あいまいなイムノブロット パターンが長時間持続すること、または疑わしいバンドが消失することによって特徴付けられます。 指定された期間の後、繰り返し免疫ブロットの結果が陰性または疑わしいままである場合、危険因子がない場合、 臨床症状または HIV 感染に関連するその他の要因がある場合、人は HIV-1 および HIV-2 に対する抗体の血清陰性と見なされる場合があります。

HIV エンベロープの一部である組織適合性の同種抗原に対する抗体の患者の血中含有量による偽陽性の結果は、gp41 および gp31 のレベルでバンドの形でイムノブロットに現れます。 他の非特異的反応 (自己免疫プロセスを持つ個人によく見られる p24 など) の原因はまだ明らかにされていません。

ELISA 試験システムの製造技術の向上により、免疫ブロット法の感度が 97% であるのに対し、最大 99.99% という高感度を達成することが可能になりました。 したがって、陽性の ELISA 結果を伴う陰性の免疫ブロット結果は、 低レベル特定の抗体。 したがって、1.5 ~ 2 か月後、つまりセロコンバージョンを完了するのに必要な時間の長さの後に研究を繰り返し、免疫ブロッティングによって検出されるのに十分な血中の特定の抗体の濃度を達成する必要があります。

HIV 感染の検査室診断の参照段階または唯一のスクリーニング段階での研究の肯定的な結果 (結果)、つまり、最終的に専門家の方法によって確認されない酵素免疫測定法試験システムでの肯定的な結果は、交差の存在として解釈されます。 -検査された抗体の血液中の反応性抗体。 交差反応性とは、陽性結果が得られる試験系で抗原性塩基として使用される HIV タンパク質またはペプチド上の非特異的部位への抗体の結合を指します。

免疫不全および HIV 感染の臨床的徴候がない場合、そのような個人は HIV に対する抗体の血清陰性とみなされ、登録を取り消されるべきです。

HIV 感染の最終診断は、すべての臨床、疫学、検査データに基づいてのみ確立されます。 主治医のみが患者に HIV 感染の診断を知らせる権利を有します。

HIV感染の確認(専門家)検査室診断の主な方法は、イムノブロッティングです。 しかし、ELISA と比較して感度が低いため、多くの研究者が、HIV に対する特異的抗体の存在を最終的に決定するために、いくつかのテスト システムを組み合わせて使用​​することを提案しています。 たとえば、G. van der Groen et al。 HIV感染の検査室診断のスクリーニング段階の肯定的な結果をチェックするためのイムノブロット法に代わる方法を提案しました。 これは、異なる性質の抗原を使用して HIV に対する特異的抗体を検出するためのさまざまな方法 (ELISA のいくつかの変形、凝集反応) に基づく 3 つの試験システムで並行して材料を研究することを含みます。 著者らは、免疫ブロッティングで得られた結果と比較した場合、100% の感度と特異性を提供するテスト システムの組み合わせを選択することができました。

この専門家による診断方法の低コストは疑いの余地のない利点ですが、患者の血液中に抗体が存在するウイルスの特定のタンパク質に関する情報が不足しているため、個々のケースでの反応の特異性を評価することもできません。セロコンバージョンの初期段階で抗体のスペクトルの変化を追跡します。

HIVに感染した母親から生まれた子供のHIV感染の検査室診断には、独自の特徴があります。 誕生の瞬間から長い間(最大15か月)、HIVに対する母体の抗体がそのような子供の血液中を循環する可能性があります。 IgGクラスの免疫グロブリンのみが胎盤関門を通過するため、子供のIgMおよびIgAクラスのHPV特異的ムポグロブリンの検出は感染を確認できますが、陰性の結果はHIVの非存在を示すことはできません.

生後 1 か月未満の子供にはまだ HPV の複製がなく、PCR が唯一の検証方法です。 生後 1 か月以上の小児における p24 抗原の測定も確認方法です。

新生児に HIV に対する抗体がないからといって、ウイルスが胎盤関門を通過していないわけではありません。 いずれにせよ、HIVに感染した母親の子供は、出生から36か月間、検査室での診断検査と観察を受けます。

結果 実験室での研究 HIV 感染のマーカーは慎重に解釈する必要があり、疫学的および 臨床検査. 一方で、最新の方法は感度が高いにもかかわらず、検査結果が陰性であっても HIV 感染の存在を完全に排除することはできないことに注意する必要があります。 したがって、例えばイムノブロッティングによる陰性の検査結果は、HIV-1 および HIV-2 に対する特異的抗体が存在しないこととしてのみ定式化できます。

血清陰性患者における HIV 感染の診断

HIV 感染の臨床検査に使用される検査システムの品質は年々向上し、感度も向上しています。 しかし、HIV の高い多様性は、既存の検査システムでは認識されない可能性のある新しいタイプの抗体の出現につながる可能性があります。 さらに、ウイルスに対する宿主生物の免疫系の非典型的な体液性応答の症例が知られている。 そのため、1996 年に L. モンタニエは、過去数年間に特定の抗体が血液中に検出されなかった 2 人の AIDS 患者について報告しました。診断は、臨床データに基づいて行われ、研究室では HPV の分離によってのみ確認されました。細胞培養で 1。 そのような場合、WHOの推奨事項を使用する必要があります。これによれば、12のAIDS定義疾患のいずれかの存在下で、成人および子供のHIV感染の臨床診断が可能です。

  1. 食道、気管、気管支、肺のカンジダ症;
  2. 肺外クリプトコックス症;
  3. クリプトスポリジウム症による下痢が 1 か月以上続く;
  4. あらゆる臓器のサイトメガロウイルス病(肝臓、脾臓および リンパ節生後 1 か月以上の患者):
  5. 生後 1 か月以上の患者で 1 か月以上持続する単純ヘルペス ウイルスによる感染症;
  6. 60歳未満の患者の脳リンパ腫;
  7. 13歳未満の子供のリンパ性間質性肺炎;
  8. Mycobacterium avium intracellulare群またはM.Kansassii群の細菌によって引き起こされる播種性感染症;
  9. ニューモシスチス肺炎;
  10. 進行性多巣性白質脳症;
  11. 生後 1 か月以上の患者の中枢神経系のトキソ プラズマ症。

これらの病気の 1 つが存在すると、HIV に対する抗体の存在を調べる検査室の血液検査がなくても、または血清陰性の結果が得られた場合でも、HIV 感染を診断することができます。

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  • ソース: 医療検査室の診断、プログラム、およびアルゴリズム。 エド。 教授 Karpishchenko A.I.、サンクトペテルブルク、Intermedica、2001

    1.血清学的方法 HIV に対する抗体 (AT) の検出 - HIV 感染を診断するための標準 (合成ペプチドに基づく ELISA テストシステム - 感度と特異度はほぼ 100% です)。 ELISA を使用すると、HIV AG を検出できます。これは、初期感染の指標である可能性もあれば、その逆の場合もあります - HIV 感染の高度な開発 (p24 AG)

    2. 確認試験- イムノブロッティング (IB)、間接免疫蛍光法 (NIF) および放射免疫沈降法 (RIP)。

    a) WHO は、IB に 2 つのエンベロープタンパク質と HIV の内部タンパク質の 1 つに対する抗体が存在する場合、血清が陽性であると見なすことを推奨しています。 ELISA で陽性だが IB の結果が不確定な患者は、臨床的に検査し、他の手段、医学的検査、免疫学的に評価する必要があり、3 ~ 6 か月後に血清の HIV に対する抗体を検査する必要があります。

    b) 間接免疫蛍光法 (NIF) 法 - 多くの研究所で確認試験として、またはスクリーニング試験として使用されます。

    c) 放射性免疫沈降は、標識された 放射性同位体アミノ酸。 この方法は、表面タンパク質に対する抗体の検出に対して非常に感度が高く、したがってウイルスのこれらの成分はセロコンバージョン後にほとんどすべての HIV 感染者に存在するため、非常に特異的です。

    3. 分子生物学的手法: 核酸の分子ハイブリダイゼーション法、PCR

    PCR が使用されます。

    1) 血清学的検査診断法に関連して、体内のウイルスの存在を検出するための代替的かつ追加の確認方法として;

    2) 特定の抗ウイルス抗体がまだ利用できない場合、初期の HIV 感染の診断における特定の分析の最初の方法として;

    3) HIV に感染した母親から生まれた新生児の HIV 感染の診断。

    4) ウイルス量を決定し、特定の抗レトロウイルス療法を処方し、その実施を監視する。

    5) 血清学的結果が不明確な場合、および血清学的分析と文化的分析の間に矛盾がある場合の明確化方法として;

    6) HIV 感染者の性的パートナーの研究。

    7) 方法として 鑑別診断 HIV-1 および HIV-2;

    4. ウイルス学的方法.

    HIV感染症の治療:

    1. 抗レトロウイルス療法の原則:重大な免疫不全が発生する前に治療を開始する必要があります。 初期治療には、少なくとも 3 つの薬剤の組み合わせを含める必要があります。 治療の変更は、少なくとも 2 つの新薬の置換または接続で構成する必要があります。 CD4+ 細胞とウイルス負荷のレベルを測定することが不可欠です。 高感度アッセイの検出限界を下回るウイルス量の減少は、治療の最適な効果を反映しています。


    2. 現代の抗レトロウイルス薬には 3 つのグループがあります。

    a) ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤 (NRTI):ジドブジン(アジドチミジン、レトロビル); ジダノシン(ddI、ビデックス); ザルシタビン(ddC、chivid); スタブジン(ゼリット、d4T); ラミブジン (3TC、エピビル); アバカビル; アデフォビル; コンビビル(ジドブジン+アバカビル); トリジビル (ジドブジン + ラミブジン + アバカビル); アデフォビル(ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤)。

    b) 非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤 (NNRTI): delaverdin (rescriptor); ネビラピン(ビラムン); イファビレンツ。

    c) プロテアーゼ阻害剤 (PI):サキナビル; リトナビル(ノルビル); インジナビル(クリキシバン); ネルフィナビル(ビラセプト); アンプレナビル(アゲナーゼ); ロピナビル(アルビラン); カレトラ(ロピナビル+リトナビル)。

    3. 任意の薬物による単剤療法では、HIV 複製を十分に顕著かつ長期的に抑制することはできません。 さらに、単剤療法では、耐性株の出現と同じグループの薬物に対する交差耐性の発生のリスクが高まります。 唯一の例外は、HIV の周産期感染のリスクを減らすための単剤療法としてのジドブジンの使用です。

    4.治療の有効性の最も重要な基準は、ウイルス量の動態です。これは、治療なしでは6〜12か月ごと、治療中は3〜6か月ごと、および治療後4〜8週間ごとに決定する必要があります。抗ウイルス療法の開始。

    抗レトロウイルス療法に加えて、合併した二次疾患の治療が必要です。

    34.3 AIDS (臨床変異型、日和見疾患)。

    日和見疾患- 免疫抑制の増加を背景に発症し、正常に機能する免疫系を持つ人には発生しない重度の進行性疾患(エイズ指標疾患)。

    a) 最初のグループ- これらは、重度の免疫不全にのみ固有の疾患です (CD4+ レベル)< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

    b) 第二グループ- 重度の免疫不全を背景に、場合によってはそれを伴わずに発症する可能性のある疾患: 1. 13歳未満の小児における細菌感染症の合併または再発(2年間の観察で2例以上):骨または関節、インフルエンザ菌、連鎖球菌によって引き起こされる膿瘍。 2.播種性コクシジオイデス症(肺外局在)。 3. HIV 脳症 4. 肺外局在を伴う播種性ヒストプラズマ症。 5. 下痢が 1 か月以上続くイソスポラ症。 6. あらゆる年齢の人々のカポジ肉腫。 7. B細胞リンパ腫(ホジキン病を除く)または未知の免疫表現型のリンパ腫。 8.肺外結核。 9. サルモネラ敗血症の再発。 10.HIVジストロフィー。

    最も一般的なのは、ニューモシスチス肺炎、クリプトコッカス髄膜脳炎、全身性サイトメガロウイルス感染症(脳炎、網膜炎、食道炎、肝炎、大腸炎)、混合病因の敗血症、全身型カポジ肉腫、肺結核です。

    これらの病気はすべて、脳、肺、肝臓、 消化管重症で進行性です。 エイズ指標疾患はさまざまな組み合わせで現れ、適切な治療を行っても期待した効果が得られません。

    AIDS の臨床的バリアント: さまざまな診療所の有病率に応じて、感染性、神経性、腫瘍性エイズ。

    1.血清学的方法 HIV に対する抗体 (AT) の検出は、HIV 感染を診断するための標準です (合成ペプチドに基づく ELISA 検査システムは、ほぼ 100% の感度と特異性を備えています)。 ELISA を使用すると、HIV AG を検出できます。これは、初期感染の指標である可能性もあれば、その逆の場合もあります - HIV 感染の高度な開発 (p24 AG)

    2. 確認試験— イムノブロッティング (IB)、間接免疫蛍光法 (NIF)、および放射免疫沈降法 (RIP)。

    a) WHO は、IB に 2 つのエンベロープタンパク質と HIV の内部タンパク質の 1 つに対する抗体が存在する場合、血清が陽性であると見なすことを推奨しています。 ELISA で陽性だが IB の結果が不確定な患者は、臨床的に検査し、他の手段、医学的検査、免疫学的に評価する必要があり、3 ~ 6 か月後に血清の HIV に対する抗体を検査する必要があります。

    b) 間接免疫蛍光法 (NIF) 法 - 多くの研究所で確認試験として、またはスクリーニング試験として使用されます。

    c) 放射性免疫沈降は、放射性同位体で標識されたアミノ酸の使用に基づく高感度で特異的な方法です。 この方法は、表面タンパク質に対する抗体の検出に対して非常に感度が高く、したがってウイルスのこれらの成分はセロコンバージョン後にほとんどすべての HIV 感染者に存在するため、非常に特異的です。

    3. 分子生物学的手法: 核酸の分子ハイブリダイゼーション法、PCR

    1) 血清学的検査診断法に関連して、体内のウイルスの存在を検出するための代替的かつ追加の確認方法として;

    2) 特定の抗ウイルス抗体がまだ利用できない場合、初期の HIV 感染の診断における特定の分析の最初の方法として;

    3) HIV に感染した母親から生まれた新生児の HIV 感染の診断。

    4) ウイルス量を決定し、特定の抗レトロウイルス療法を処方し、その実施を監視する。

    5) 血清学的結果が不明確な場合、および血清学的分析と文化的分析の間に矛盾がある場合の明確化方法として;

    6) HIV 感染者の性的パートナーの研究。

    7) HIV-1 と HIV-2 の鑑別診断の方法として;

    4. ウイルス学的方法.

    1. 抗レトロウイルス療法の原則:重大な免疫不全が発生する前に治療を開始する必要があります。 初期治療には、少なくとも 3 つの薬剤の組み合わせを含める必要があります。 治療の変更は、少なくとも 2 つの新薬の置換または接続で構成する必要があります。 CD4+ 細胞とウイルス負荷のレベルを測定することが不可欠です。 高感度アッセイの検出限界を下回るウイルス量の減少は、治療の最適な効果を反映しています。

    2. 現代の抗レトロウイルス薬には 3 つのグループがあります。

    a) ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤 (NRTI):ジドブジン(アジドチミジン、レトロビル); ジダノシン(ddI、ビデックス); ザルシタビン(ddC、chivid); スタブジン(ゼリット、d4T); ラミブジン (3TC、エピビル); アバカビル; アデフォビル; コンビビル(ジドブジン+アバカビル); トリジビル (ジドブジン + ラミブジン + アバカビル); アデフォビル(ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤)。

    b) 非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤 (NNRTI): delaverdin (rescriptor); ネビラピン(ビラムン); イファビレンツ。

    c) プロテアーゼ阻害剤 (PI):サキナビル; リトナビル(ノルビル); インジナビル(クリキシバン); ネルフィナビル(ビラセプト); アンプレナビル(アゲナーゼ); ロピナビル(アルビラン); カレトラ(ロピナビル+リトナビル)。

    3. 任意の薬物による単剤療法では、HIV 複製を十分に顕著かつ長期的に抑制することはできません。 さらに、単剤療法では、耐性株の出現と同じグループの薬物に対する交差耐性の発生のリスクが高まります。 唯一の例外は、HIV の周産期感染のリスクを減らすための単剤療法としてのジドブジンの使用です。

    4.治療の有効性の最も重要な基準は、ウイルス量の動態です。これは、治療なしでは6〜12か月ごと、治療中は3〜6か月ごと、および治療後4〜8週間ごとに決定する必要があります。抗ウイルス療法の開始。

    抗レトロウイルス療法に加えて、合併した二次疾患の治療が必要です。

    34.3 AIDS (臨床変異型、日和見疾患)。

    日和見疾患- 免疫抑制の増加を背景に発症し、正常に機能する免疫系を持つ人には発生しない重度の進行性疾患(エイズ指標疾患)。

    a) 最初のグループ- これらは、重度の免疫不全にのみ固有の疾患です (CD4+ レベル)< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

    b) 第二グループ- 重度の免疫不全を背景に、場合によってはそれを伴わずに発症する可能性のある疾患: 1. 13歳未満の小児における細菌感染症の合併または再発(2年間の観察で2例以上):骨または関節、インフルエンザ菌、連鎖球菌によって引き起こされる膿瘍。 2.播種性コクシジオイデス症(肺外局在)。 3. HIV 脳症 4. 肺外局在を伴う播種性ヒストプラズマ症。 5. 下痢が 1 か月以上続くイソスポラ症。 6. あらゆる年齢の人々のカポジ肉腫。 7. B細胞リンパ腫(ホジキン病を除く)または未知の免疫表現型のリンパ腫。 8.肺外結核。 9. サルモネラ敗血症の再発。 10.HIVジストロフィー。

    最も一般的なのは、ニューモシスチス肺炎、クリプトコッカス髄膜脳炎、全身性サイトメガロウイルス感染症(脳炎、網膜炎、食道炎、肝炎、大腸炎)、混合病因の敗血症、全身型カポジ肉腫、肺結核です。

    これらの疾患はすべて、脳、肺、肝臓、胃腸管などの 1 つまたは複数の臓器やシステムの損傷とともに発生し、深刻な進行性のものです。 エイズ指標疾患はさまざまな組み合わせで現れ、適切な治療を行っても期待した効果が得られません。

    AIDS の臨床的バリアント: さまざまな診療所の有病率に応じて、感染性、神経性、腫瘍性エイズ。

    HIV:診断と治療、予防

    後天性免疫不全症候群は、40 年以上にわたって現代社会の重要な問題の 1 つとなっています。 そのため、HIV 診断は現在、多くの注目とリソースを集めています。 結局のところ、体の免疫システムを破壊するウイルスが検出されるのが早ければ早いほど、致命的な結果を回避できる可能性が高くなります。

    HIV という略語の下に、既存のウイルスの中で最も危険なウイルスの 1 つである、ヒト免疫不全ウイルスの定義があります。 その影響下で、体のすべての保護特性が深く阻害されます。 これは、さまざまな悪性腫瘍や二次感染の出現につながります。

    HIV 感染はさまざまな方法で進行する可能性があります。 この病気は3〜4年で人を破壊することもあれば、20年以上続くこともあります。 このウイルスは不安定で、宿主の体外にあるとすぐに死滅することを知っておく価値があります。

    HIV は、血液との接触や生体接触機構を介して人為的に感染する可能性があります。

    ウイルスの保因者との接触が 1 回だけの場合、感染のリスクは低くなりますが、絶え間ない相互作用により、感染のリスクは大幅に増加します。 HIV 感染の診断は無視できないものであり、特に性的パートナーを変更する場合はなおさらです。

    非経口感染経路に注意してください。 汚染された血液の輸血、HIV 感染者の血液で汚染された針を使用した注射、および非滅菌医療処置 (タトゥー、ピアス、適切に処理されていない器具を使用した歯科処置) の際に発生する可能性があります。 .

    同時に、ウイルスの接触家庭感染を恐れる必要がないことを知っておく価値があります。 しかし、事実は変わりません。人は HIV 感染に対して高い感受性を持っています。 また、35 歳以上の被験者が感染した場合、エイズの発症は、30 年のマイルストーンをまだ克服していない人よりもはるかに速く発生します。

    もちろん、 最良の方法問題またはその欠如を特定することは、HIV感染の診断です。 しかし、人が導くことができる理由は何ですか 健康的な生活様式感染の事実を自分で確認しますか? 当然、そのようなイニシアチブは何かによって正当化されるべきです。 したがって、どのような症状が免疫系を低下させる破壊的なプロセスを示している可能性があるかを知ることが重要です.

    この時点で体はまだ敵対的な要素に反応しないため、血液検査なしでウイルスの潜伏段階が検出される可能性は低いです。

    医師の助けを借りていない第2段階(一次症状)も見過ごされる可能性があります。 しかし、時にはウイルスの活発な複製があり、体がこれに反応し始めます-発熱、さまざまな多形性発疹、リーナル症候群、咽頭炎が認められます。 第二段階では、ヘルペス、真菌感染症、肺炎などの二次疾患を伴う可能性があります。

    3番目の潜伏期は、免疫不全が徐々に増加することを特徴としています。 防御システムの細胞が死ぬという事実により、それらの生産のダイナミクスが増加し、これにより、目に見える損失を補うことが可能になります。 この段階では、異なる系統に属するいくつかのリンパ節が炎症を起こすことがあります。 しかし、強い痛みは観察されません。 平均して潜伏期間は 6 年から 7 年続きますが、最大 20 年遅れることがあります。

    4番目の二次疾患の段階では、真菌、細菌原虫、ウイルス起源、および悪性腫瘍の同時感染があります。 これはすべて、重度の免疫不全を背景に発生します。

    HIV感染の診断方法

    ウイルスへの曝露による身体の防御メカニズムの深い阻害について言えば、この場合の患者の将来はタイムリーで正確な診断に直接依存することに注意する価値があります。

    このために 現代医学免疫化学発光や酵素免疫測定法に基づくさまざまな試験システムが使用されています。 これらの技術は、異なるクラスに属する抗体の存在を決定することを可能にします。 この結果は、感染症を扱う際の分析方法、臨床的特異性および感度の情報量を大幅に増やすのに役立ちます。

    HIV診断を根本的に新しいレベルに引き上げることを可能にしたのがポリメラーゼ連鎖反応法であったことも興味深い. 血漿、生検、スクレイピング、血清、脳脊髄液または胸膜液など、さまざまな生物学的材料が研究用の材料として適しています。

    実験室での研究方法について言えば、それらは主にいくつかの重要な疾患の特定に焦点を当てています. HIV感染、結核、すべての性感染症、ウイルス性肝炎について話しています。

    免疫不全ウイルスを特定するために、分子遺伝学的および血清学的検査も使用されます。 最初のケースでは、ウイルスの RNA とプロウイルスの DNA が決定され、2 番目のケースでは、HIV に対する抗体が分析され、P24 抗原が検出されます。

    いわば古典的な診断方法を使用する診療所では、血清学的検査の標準プロトコルが主に使用されます。

    HIVの早期診断

    この種の感染の事実の決定は、免疫システムへの損傷の脅威をできるだけ早く特定するために必要です。 これは、第一に、感染の拡大を回避し、第二に、初期段階で病気に影響を与えます。

    ロシアの例を考えると、HIV感染の臨床分類がロシア連邦の陸軍と海軍に導入されました。 これは肯定的な結果をもたらしました。初期の臨床診断のプロセスがはるかに簡単になりました。

    免疫系への損傷の可能性を示す一般的な症状として、 頭痛, 寝汗そしてやる気のない疲労。 扁桃炎の徴候を伴う発熱の可能性もあります。 これは、温度が38度以上に上昇することを意味し、同時に口蓋扁桃腺が増加し、嚥下時にも痛みが現れます. これはすべて、急速な減量によって補完されます。 しかし、これらの症状はしばしば複雑です。

    場合によっては、初期段階のHIV感染は、皮膚の状態のさまざまな変化の形で現れることがあります。 斑点、突疹、膿疱、せつなどについて話しています。初期の HIV 診断には、末梢リンパ節の全身性または限定的な肥大などの症状への対処も含まれます。

    鼠径部を除いて、複数のリンパ節の同時増殖が3か月以上続き、異なるグループである場合、ヒト免疫系のウイルスを疑うあらゆる理由があります.

    後の診断について言えば、さまざまな臨床症状を装ってしばしば発生する二次免疫不全の症状に注意を払う必要があります。 これらは次の症状です。

    • やる気のない全身性末梢リンパ節腫脹;
    • 起伏のあるコースを持つ未知の病因の関節痛;
    • ARVI (ARI)、肺の炎症性病変および 気道、それは自分自身をかなり頻繁に感じさせます。
    • 原因不明の発熱と長引く亜熱状態;
    • やる気のない衰弱、疲労、無気力などによって現れる一般的な中毒。
    • 後期 HIV 診断には、カポジ肉腫などの疾患のスクリーニングが含まれます。これは、多くの場合若い人の上半身に発生する複数の新生物の出現によって明らかになり、その後に動的な発生と転移が続きます。

      ポリメラーゼ連鎖反応

      HIV感染を診断するためのさまざまな方法を考慮すると、これには特別な注意が必要です。 この血液検査は、定量的および定性的特性を対象とすることができることにすぐに注意する必要があります。

      このウイルス検出方法の目標として、次のタスクを定義できます。

    • HIV感染の早期診断;
    • イムノブロッティング研究の結果として疑わしい結果が存在する場合の明確化;
    • 病気の特定の段階の識別;
    • ウイルスの抑制を目的とした治療の有効性を監視します。

    一次感染について話す場合、この手法を使用すると、感染の瞬間から14日後に患者の血液中のHIV RNAを特定できることに注意してください。 これは非常に良い結果です。 この場合、研究自体の結果は定性的な表現を持つことになります: 陽性 (ウイルスが存在する) または陰性のいずれかです。

    PCRによる定量化

    このタイプのポリメラーゼ連鎖反応は、AIDS の発症率を決定し、患者の余命を予測するために使用されます。

    血液中の HIV RNA 細胞を定量化することで、病気がいつ臨床段階に入るかを理解することができます。

    分析に必要な生体材料が正しく決定され、そのサンプリングが正しく実行された場合、HIVの検査室診断の方法がより正確な結果をもたらすという事実に注意を払う価値があります。

    感染者の質的モニタリングを実施するためには、(可能であれば)患者の免疫状態の研究に統合されたアプローチを使用する必要があります。 私たちは、防御システムのすべての部分の定量的および機能的決定について話している:細胞性免疫、体液性免疫および非特異的抵抗など。

    検査室診断

    現代の実験室条件では、免疫系の状態を評価するための多段階の方法がますます使用されています。 この技術は、多くの場合、血液中の免疫グロブリン、リンパ球の亜集団の決定を伴います。 これは、CD4/CD8 細胞の比率が考慮されていることを意味します。 結果が 1.0 未満の場合は、免疫不全を疑う理由があります。

    このウイルスはCD4リンパ球への選択的損傷を特徴とし、上記の比率(1.0未満)の顕著な違反につながるため、HIV感染の検査室診断には必ずこの検査を含める必要があります。

    免疫学的状態を評価するために、医師は、体液性免疫および細胞性免疫のシステムにおける「全体的な」または一般的な欠陥の存在についてテストを行うことができます。 私たちは、末期の低ガンマグロブリン血症または高ガンマグロブリン血症、ならびにサイトカインの産生の減少、循環免疫複合体の濃度の増加、マイトジェンおよび抗原に対するリンパ球の反応の弱体化について話している.

    HIVの検査室診断には2つの重要な段階があるという事実に注意を払う価値があります。

    1. スクリーニング検査室。 ELISA(酵素免疫測定法)で陽性結果が得られた場合は、同じシステムで血清を変更せずにさらに2回繰り返します。 3回の検査のうち2回でウイルスの影響が検出された場合、血清はさらなる分析のために参照検査室に送られます。
    2. HIV感染の検査室診断の方法を含む第2段階は、免疫系の状態の決定です。 上記の参照実験室で実施されます。 ここでは、陽性の血清が再び ELISA で検査されますが、以前の抗原、抗体の組成、または検査自体の形式とは異なる別の検査システムを使用しています。 否定的な結果を決定するとき、2 番目の研究は、3 番目のテスト システムで実行されます。 最終的にウイルスの影響が検出されなかった場合は、HIV 感染の不在が記録されます。 しかし、陽性の結果が得られた場合、血清は線形ブロットまたは免疫ブロットで検査されます。

    最終的に、そのようなアルゴリズムは、肯定的、中立的、または否定的な結果につながります。

    すべての市民は、HIV 診断が利用できることを知っておく必要があります。 エイズは、民間、地方自治体、または公衆衛生の場で特定できます。

    当然のことながら、ウイルスの識別は、 さまざまな方法感染への影響。 現時点では、ウイルスを完全に中和できるワクチンはまだありませんが、有能な診断、HIV治療、およびその後の予防により、患者の状態を大幅に改善し、それによって患者の寿命を延ばすことができます. この論文は、適時に HIV 治療を開始した男性の平均余命が 38 歳であるという事実を裏付けています。 免疫不全ウイルスとの闘いを始めた女性の平均寿命は 41 年です。

    診断が下されると、HIV 治療はいくつかの技術の使用に縮小されます。 HAART としても知られる積極的な抗レトロウイルス療法は、最も一般的なものの 1 つとして特定できます。 このタイプの治療が適時に適切に適用されれば、エイズの発症を大幅に遅らせるか、完全に止めることができます。

    HAART の本質は、免疫不全ウイルスの発生のさまざまなメカニズムに影響を与えることを目的として、複数の医薬品を同時に使用することです。

    HIVを診断するさまざまな方法で感染の事実を特定した後、次の種類の効果を持つ薬を使用できます。

  • 免疫学的。免疫システムが安定し、T リンパ球のレベルが上昇し、さまざまな感染症に対する保護が回復します。
  • 臨床。 AIDSの発症とその症状のいずれかが予防され、患者の寿命はすべての身体機能が維持されて延長されます.
  • ウイルス学的。ウイルスの繁殖が妨げられ、その結果、ウイルス量が減少し、その後低レベルに固定されます。
  • HIV 感染の診断、治療、予防など、この病気に影響を与える対策の重要性を過大評価することは困難です。 したがって、感染症の研究で肯定的な結果が得られた後にできる最善のことは、すぐに病気との戦いを開始することです. これを行うのに役立つ別の方法として、ウイルス学的治療を特定できます。

    この場合、ウイルスがTリンパ球に付着して体内に入らないようにする薬の使用について話している. これらの薬は浸透阻害剤と呼ばれます。 具体例はCellzentryです。

    ウイルスプロテアーゼ阻害剤は、HIV を抑制するために使用できます。 このグループの薬の目的は、新しいリンパ球の感染を防ぐことです。 これらは、ビラセプト、レヤタズ、カレトラなどの薬です。

    局所薬の 3 番目のグループは、逆転写酵素阻害剤です。 それらは、ウイルスの RNA がリンパ球の核内で増殖することを可能にする酵素をブロックするために必要です。 このような方法は、HIV 感染などの問題に大きな影響を与える可能性があります。 エイズの診断、治療、予防は有資格の医師の仕事であるため、薬を使用するためのアルゴリズムは医師が作成する必要があります。

    必要に応じて、免疫学的および臨床的効果も使用できます。

    世界保健機関は、HIV感染と戦うために次の方法を提案しています。

  • 性感染症の予防。 これらは、保護されたセックス、コンドームの配布、性感染症の治療、および教育プログラムです。
  • HIV と診断された妊婦のための診断、適切な化学物質による予防、および専門的なカウンセリングと治療。
  • 血液製剤による予防の組織。 この場合、抗ウイルス処理とドナーの検証について話しています。
  • 社会と 健康管理患者さんはもちろん、そのご家族も。
  • HIV 診断でウイルスの存在を明らかにしないためには、簡単な安全規則に従う必要があります。

  • 感染者の血液が皮膚に付着した場合は、直ちに石鹸と水で洗い流し、アルコールで処理する必要があります。
  • ウイルスの要素を含む物体が損傷を受けた場合は、傷を圧迫し、血液を絞り出し、この場所を過酸化水素で処理し、端をヨウ素で燃やす必要があります。
  • 無菌性が損なわれた注射器は決して使用しないでください。
  • 性交中にコンドームを使用しますが、最初にパートナーの感染を確認することをお勧めします。
  • HIV 診断が止まらないという事実のおかげで、何千人もの人々が時間通りに治療を開始し、平均余命を大幅に延ばす機会を得ています。 主なことは、明らかな症状を無視せず、医者に行くことを恐れないことです.

    HIV感染症の検査診断

    以下は、HIV感染の検査の対象となります。

    2. 診断が疑われる、または確定された人: 細菌感染 13 歳未満の小児では、多発性および再発性。 食道、気管、気管支または肺のカンジダ症; 子宮頸部浸潤がん; 播種性または肺外コクシジオイデス症; 肺外クリプトコックス症; 1か月以上の下痢を伴うクリプトスポリジウム症; 1か月以上経過した患者の肝臓、脾臓、リンパ節を除く他の臓器のサイトメガロウイルス病変; 視力喪失を伴うサイトメガロウイルス網膜炎; 1か月以内に治癒しない多発性潰瘍、または気管支炎、肺炎、食道炎を引き起こすヘルペス感染; 播種性または肺外性ヒストプラズマ症; 1か月以上の下痢を伴うイソスポラ症; 結核の広範囲または肺外; 成人または 13 歳以上の青年の肺結核; 肺外結核; 播種性結核菌または肺外結核菌を除く、マイコバクテリアによって引き起こされるその他の疾患; ニューモシスチスによる肺炎; 進行性多巣性白質脳症; サルモネラ菌 (チフス菌を除く) 敗血症、再発性; 生後 1 か月以上の小児における脳トキソイラーゼ; カポジ肉腫; 13歳未満の小児のリンパ性間質性肺炎; バーキットリンパ腫; 免疫芽球性リンパ腫; 原発性脳リンパ腫; 消耗症候群、B 型肝炎、HBsAg の保有。 伝染性単核球症; 60歳以上の人における帯状疱疹の再発; 性感染症。

    高度に専門化された実験室で行われます:

    a) 血液中を循環する抗体、抗原、および免疫複合体の測定; ウイルスの培養、そのゲノム物質と酵素の検出。

    b) 免疫系の細胞リンクの機能の評価。 主な役割は、血液やその他の体液中の病原体抗原だけでなく、抗体の測定を目的とした血清学的診断の方法に属しています。

    HIVに対する抗体の検査は、次の目的で実施されます。

    a) 輸血および移植の安全性;

    b) サーベイランス、HIV 感染の有病率を監視し、特定の集団におけるその有病率のダイナミクスを研究するための検査。

    c) HIV 感染の診断、すなわち、実質的に健康な人またはさまざまな疾患を持つ患者の血清の任意検査 臨床徴候 HIV感染やエイズに似た症状。

    HIV 感染の検査室診断システムは、3 段階の原則に基づいています。 最初の段階はスクリーニングで、HIV タンパク質に対する抗体の存在について一次血液検査を行うように設計されています。 第 2 段階は参照的です。スクリーニング段階で得られた主要な肯定的な結果を明確にする (確認する) ために、特別な方法論的手法を使用することができます。 第 3 段階 - 専門家は、ラボ診断の前の段階で特定された HIV 感染マーカーの存在と特異性を最終的に検証することを目的としています。 検査室診断のいくつかの段階の必要性は、主に経済的な考慮事項によるものです。

    実際には、HIV感染者を十分に確実に特定するために、いくつかの検査が使用されています。

    最初のレベルを検出するためのELISA(ELISA)テスト(酵素結合免疫吸着アッセイ)は、以下よりも特異性は低いものの、感度が高いという特徴があります。

    免疫ブロット (ウェスタンブロット)、HIV-1 と HIV-2 を区別するための非常に特異的で最もよく使用されるテスト。

    抗原血症p25検査、有効 初期段階感染;

    ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR)。

    血液サンプルのマス スクリーニングの場合、各サンプルの最終希釈が 1:100 を超えないようにまとめられた、被験者グループからの血清の混合物をテストすることをお勧めします。 血清と現在の混合液が陽性の場合、陽性混合液の各血清が検査されます。 この方法では、ELISA と免疫ブロットの両方で感度が低下することはありませんが、人件費と初期検査の費用が 60 ~ 80% 削減されます。

    HIV 感染の一次血清診断では、スクリーニングスクリーニング検査 (ELISA および凝集反応) を使用して総抗体を測定します。 2番目の(調停)段階では、より複雑なテストが使用されます-免疫ブロットは、最初の結論を確認または拒否するだけでなく、ウイルスの個々のタンパク質に対する抗体を決定するレベルでこれを行うこともできます.

    リンクされた免疫吸着アッセイ(ELISA) は、HIV に対する抗体を決定するための主要かつ最も広く使用されている方法です。 しかし、HIV 感染の血清診断に ELISA を使用することの欠点には、偽陽性の結果が頻繁に出ることが含まれます。 この点で、ELISA の結果は、被験者が HIV 血清陽性であると結論付ける根拠にはなりません。 これは、バラストタンパク質からの免疫吸着剤の精製が不十分なためです。 免疫吸着剤によって占有されていない領域が十分にブロックされていないか、完全に特別な中性タンパク質によってブロックされていない場合、血清抗体がプラスチックに自発的に結合します。 特定の、より頻繁に自己免疫を持つ個人の血液中に存在する様々なタンパク質の免疫吸着剤のHIVタンパク質との交差相互作用 病理学的プロセス多発性硬化症、SLE、結核の種類; 頻繁な寄付、感染症および腫瘍性疾患、火傷、妊娠、輸血の繰り返し、臓器、組織の移植、および血液透析を受けている人; 血液中にリウマチ因子が存在すると、HIV偽陽性反応を引き起こすことがよくあります。 HIV gagタンパク質、とりわけp24タンパク質に対する抗体が検査された人々の血中に存在すること(明らかに、抗体はまだ同定されていない外因性または内因性のレトロウイルスに対して形成されます)。 抗 p24 は HIV セロコンバージョンの初期段階で確実に合成されるため、HIV gag タンパク質に対する抗体を持つ個人のさらなる免疫学的モニタリングと、寄付からの除外が行われます。

    酵素イムノアッセイの感度と特異性は常に向上しています。 その結果、第 4 世代 ELISA の診断能力は免疫ブロッティングに劣らず、スクリーニングだけでなく、HIV 感染の診断の確認段階でも使用できます [Smolskaya T. T., 1997]。

    イムノブロッティング血清学的診断の最終的な方法であり、被験者の HIV 陽性または陰性について最終的な結論を下すことができます。

    イムノブロットと ELISA での血清研究の結果の間には明確な相関関係があります。異なる試験システムを使用した ELISA で 2 度陽性であり、症例の 97 ~ 98% の血清がイムノブロットで HIV 陽性であることが判明しました。 使用した 2 つのテスト システムの 1 つだけで血清が ELISA で陽性だった場合、それらは 4% のケースでのみ免疫ブロットで陽性です。 5% の症例で、陽性データを持つ人々で確認研究を行うと、ELISA 免疫ブロットは「不確定」な結果をもたらす可能性があり、そのうち約 20% の症例で、HIV-1 gag タンパク質に対する抗体 (p55、p25、p18 )。 HIV-1 gag タンパク質のみに対する抗体の存在は、HIV-2 感染の血清の追加検査の理由です。

    イムノブロッティングの結果の評価は、テストシステムに添付されている説明書に従って厳密に行われます。 結果の解釈に関するガイダンスがない場合は、WHO 基準を使用する必要があります。

    HIV感染の検査室診断の参照段階で陽性の検査結果と免疫ブロッティング法による検査の陰性結果を受け取ると、最初の検査の6か月後に必須の専門家による診断が繰り返されます。

    最初のサンプルの研究から 12 か月後のイムノブロッティングの結果が陰性または不確定のままである場合、危険因子、臨床症状、または HIV 感染に関連する他の要因がない場合、被験者は診療所の観察から除外されます。

    血清学的方法の中で、不確定な結果の場合、免疫ブロットは専門家の診断として使用されます。 放射性免疫沈降(RIP)。 これは、放射性ヨウ素で標識されたウイルスタンパク質の使用に基づいており、ベータカウンターを使用して沈殿物が検出されます。 この方法の欠点には、機器のコストが高いこと、これらの目的のために特別な部屋を用意する必要があることが含まれます。

    HIV 感染と診断された人は、6 か月ごとに必須の臨床検査を伴う常時動的モニタリングを受けます。

    ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) は、特定の病原体のゲノムに固有の事前に増幅されたヌクレオチド配列を明らかにします。 増幅と呼ばれる遺伝子またはその断片の分離された増殖である PCR は、酵素である耐熱性 DNA ポリメラーゼを使用して in vitro で実行することを可能にします。 2 ~ 3 時間で、PCR により、ウイルスの特定のセクションの数百万のコピーを取得できます。 HIV感染では、ウイルスのRNAを含む細胞RNAから、それが細胞内で複製された場合、またはそのゲノムに組み込まれた場合、逆転写および標識オリゴヌクレオチド「プローブ」とのハイブリダイゼーションを使用して、十分な量のプロウイルスDNAが得られます検出され、定量的に特徴付けられる分析、およびHIVゲノムに属することに関連して、プローブの放射性または他の標識によるDNAおよびウイルス特異的アミノ酸配列の相同性を確立します。 PCR の感度は、5000 個の細胞のうちの 1 個のウイルス遺伝子の検出です。

    定量を含む PCR は、開始の問題を解決するために血漿上のウイルス量を決定するためにのみ使用できます。 薬物治療患者または抗レトロウイルスの変更 . PCRはHIV感染の診断にはお勧めできません。その製剤と試薬の最先端の方法でさえ、ウイルス量を特定のレベル(50コピー/ ml)以上に決定できるからです。 また、PCR のセットアップの複雑さとその高コスト (約 200 ドル) により、HIV 感染の日常的な検査診断の方法として大規模に使用することはできません。 したがって、PCR は、患者の治療の問題を解決するために、HIV 感染の診断が既に確立されている患者の血漿中のウイルス負荷を評価するためにのみ不可欠なままです。

    模式的に、HIV感染の検査室診断の段階を図1に示します。 1。

    米。 1. HIV感染の検査室診断の段階

    HIV 感染時には、抗 HIV 抗体の量が検査システムの感度に対して不十分な「暗い実験室」の期間があります。 この期間は、検査システムの感度レベルに応じて、HIV 感染の瞬間から 1 週間から 3 か月の範囲です。 この現象を考慮すると、前述の HIV 感染期間にある人から献血された血液を検査する際に困難が生じます。 したがって、世界のほとんどの国では、これらの量の血液の提供者の HIV 感染の強制的な再検査を実施するために、血液が 3 ~ 6 か月間保存された後にのみ血液を使用するためのシステムが導入されています。およびそのコンポーネント。

    一次症状の段階は、複製プロセスの活動によって特徴付けられます。 結果として生じるウイルス血症および抗原血症は、IgM クラスの特定の抗体の形成を引き起こします: 抗 p24、抗 gp41、抗 gp120。 一部の感染者の p24 抗原は、感染後 2 週間という早い時期に ELISA によって血液中に検出され、8 週目まで測定できます。 さらに、HIV感染の臨床経過では、血液中のp24タンパク質の含有量の2番目の上昇が認められ、それはAIDS段階の形成期間に当てはまります。

    HIV gp41、p24、gp120の構造タンパク質に対するIgGクラスの高レベルの特異的抗体が末梢血に記録されるとき、完全なセロコンバージョンの出現は、HIV感染の診断を非常に容易にする。 ほとんどの市販キットは、まさにそのような抗体を示すように設計されています。

    HIV 感染患者の抗体を検出する際の困難は、大量のウイルス血症および抗原血症の期間中に発生する可能性があります。これは、血中の利用可能な特定の抗体がウイルス粒子に結合するために使い果たされ、複製プロセスが新しい抗ウイルス抗体の産生よりも進んでいる場合です。

    初期に免疫系が弱まっている人では、ウイルス血症と抗原血症が早期に現れ、病気が治るまで高レベルのままです。 同時に、そのような患者は、2つの理由により、HIVに対する遊離抗体の含有量が低くなります-Bリンパ球による抗体の不十分な産生と、ビリオンと可溶性HIVタンパク質の抗体結合。免疫複合体からの抗体の放出の段階を提供するために、分析方法の感度または変更が必要です。

    HIV 感染の特定のマーカーが豊富にあるにもかかわらず、最も頻繁に決定されるのは、HIV タンパク質に対する全抗体の存在です。 「合計」という用語は、2 つのクラスの抗体 (IgG および IgM) の存在を意味します。 広範囲 HIVのさまざまな、主に構造的なタンパク質に対する抗体。

    CD4 細胞の測定。 HIV感染の段階、日常生活における患者の免疫系の破壊の程度を診断するための主な臨床的および実験的指標は、CD4 +リンパ球の含有量の決定でした。200細胞/ mm3未満のレベルの減少は、エイズ診断の主な基準。 CD4+ リンパ球数が 200 個/mm3 以下のすべての HIV 感染者には、抗ウイルス療法とニューモシスチス肺炎の予防の両方が必要であると考えられています。 CO4+-リンパ球の数が 200 個/mm3 未満の HIV 感染者の 1/3 は、 臨床症状、経験上、次の2か月で症状が現れることが示されているため、すべてエイズの段階にある患者と見なされます。

    HIV感染の診断

    人がHIVに感染しているかどうかはどうやってわかりますか? HIV 感染を診断するための最も一般的な方法は、酵素免疫測定法 (ELISA) です。 ELISA 検査システムは、血清中の HIV に対する抗体を検出するために使用されます。

    HIV 感染は、スクリーニング検査と確認検査の 2 つの異なる検査によって確認されます。 感度が高いため、スクリーニング検査で偽陽性の結果が得られる場合があります。 したがって、通常、最初の陽性結果が得られると、同じ血液サンプルが採取され、スクリーニング検査が 2 回繰り返され、再び陽性である場合にのみ、別の種類の確認検査が行われます。 確認検査は、繰り返し陽性となる(「反応性」がある)血液サンプルに対してのみ行われます。

    最も一般的なスクリーニング検査は、酵素免疫測定法 (ELISA) です。 通常、免疫ブロッティングは確認検査として使用されます。 2つの組み合わせ 他の種類テストは、得られた結果が「高精度」であることを保証します。

    スクリーニング検査システムは、ウイルスタンパク質に反応して体内で生成された特定の抗体を「キャッチ」する、人工的に作成された HIV タンパク質を使用します。 抗体が捕捉されると、「色の変化を引き起こす酵素などの指示薬と組み合わせて適用される試薬によって検出できます」。 色の変化はマシンによって読み取られ、結果が決定されます。 免疫ブロッティングも同様に機能しますが、分子量に基づいて異なる成分を識別する電場を使用します。 これにより、特定のウイルス抗原に対する抗体を特定することが可能になり、それが識別可能な「縞」として紙に描かれます。 最新の検査システムでは、ほとんどの人で 3 ~ 5 週間で HIV 感染を検出できます。

    HIVに感染するリスクがあった場合、いつ検査を受けることができますか?

    HIV の診断に使用される酵素免疫測定法 (ELISA) は、感染後数週間まで結果が表示されない場合があります。 このタイプの分析は、ウイルス自体を特定するのではなく、ウイルスに対する抗体を特定します。 一部の人では、2週間後に十分な量の抗体が血中に存在します。 しかし、ほとんどの人が抗体を形成する(セロコンバージョン)のに時間がかかります。 テスト結果が十分に信頼できるものであるためには、危険な状況から約 3 か月が経過している必要があります。 抗体の形成には、3〜6か月かかる場合があります。

    3 か月後に検査結果が陰性の場合、6 か月後に 2 回目の検査を行う必要がありますか?

    大多数の人では、検査は 3 か月後にはかなり信頼できるものになります (ほとんどの場合、抗体はそれよりも早く現れます)。 6か月後にテストに合格することで、感染の可能性を完全に排除できます。

    テスト結果はどのくらい待つ必要がありますか?

    それは、試験が実施される試験所の特性に依存します。 ELISA 検査はその日のうちに行うことができますが、ほとんどの検査室では、この期間は 1 ~ 2 日から 2 週間かかる場合があります。 結果を待つことは非常にイライラする期間になる可能性があることを考慮すると、分析を行う前に、この問題を事前に明確にしておくことをお勧めします. また、土日祝日がテストのタイミングに影響するかどうかも確認できます。

    陽性の検査結果はどの程度信頼できますか?

    ELISA で偽陽性の結果が得られることがあります (約 1% のケース)。この結果の理由は、妊娠、さまざまな可能性があります。 ウイルス感染、および単純なランダム性。 肯定的な結果を受け取った後、診断が行われる結果に応じて、より正確なテスト、つまり免疫ブロットが必要です。 ELISA 陽性後の免疫ブロット陽性結果の信頼性は 99.9% です。これは、あらゆる医療検査の最大精度です。 免疫ブロットが陰性の場合、最初の検査は偽陽性であり、実際にはその人は HIV に感染していません。

    不確定な (疑わしい) 結果とは何ですか?

    ELISA が陽性または陰性の場合、イムノブロットは陽性、陰性、または不確定である可能性があります。 不確定な免疫ブロットの結果、すなわち 感染が最近発生し、血中の HIV に対する抗体がまだほとんどない場合、ウイルスに対する少なくとも 1 つのタンパク質の免疫ブロットでの存在が観察されます。この場合、免疫ブロットはしばらくすると陽性になります。 また、肝炎で HIV 感染がない場合、不確定な結果が現れることがあります。 慢性疾患交換自然、または妊娠中。 この場合、免疫ブロットが陰性になるか、不確定な結果の原因が見つかります。

    仕事に応募するときにHIV検査を受ける必要がありますか?

    ロシア連邦の法律によると、強制的なHIV検査は、献血者、ロシア連邦の領土に3か月以上入国することを希望する外国人、無国籍者、および直接働く医療関係者にのみ許可されています。血で; 拘置所にいる人。 その他のすべての市民は、自発的に HIV 検査を受けます。

    HIV感染ヒト免疫不全ウイルス (HIV) の感染によって引き起こされる疾患。

    HIV は、レトロウイルス科に属する RNA ウイルスです。

    レトロウイルスの一般的な特性は、酵素 - 逆転写酵素 (リバーターゼ) の存在です。これは、RNA から DNA の形で遺伝的に正確なコピーを「除去」します。 形態、ゲノム構造、およびその他の特徴によると、HIVはレンチウイルスのファミリー、つまり遅い感染のウイルスに属します。 このファミリーのウイルスによって引き起こされる病気の一般的な特徴には、次のものが含まれます。正確な日付がない長い潜伏期間(1か月から10年以上)。 知覚できない、無症候性の病気の発症; ゆっくりと成長している臨床像; 免疫系を介した病因の媒介と、ウイルスの高い遺伝的変異率。 これらすべてが、HIV感染の診断、治療、および予防を非常に複雑にしています。

    現在知られている HIV には、HIV-1 と HIV-2 の 2 種類があります。 HIV-2 によって引き起こされる病気は、ゆっくりとしたダイナミクスとより長い経過によって特徴付けられます。

    疫学と感染経路:

    HIV感染は人為的感染症であり、人にとって病原体の唯一の発生源はウイルスキャリアとエイズ患者です。

    ウイルス粒子 (ビリオン) は体のすべての生体液に存在しますが、濃度は異なります。 ウイルスの含有量が最も多いのは血液と精液です。

    ウイルスは次の 3 つの方法で伝染します。

    母親から胎児・新生児へ。

    HIV は、通常の家庭内接触や空気中の飛沫によっては感染しません。 吸血昆虫に刺されてHIVに感染した例はありません。

    ただし、HIV の感染力は他の STI ほど高くはありません。 したがって、HIV に感染した 1600 人を超える調査対象の性的パートナーのうち、このウイルスに感染したのは 15% だけでした。

    HIV感染の発症は、2つの相互作用する要因によって決定されます。HIVの主な病原性 - 感染した人の免疫系を弱めるという性質と、病気の過程で発生する身体の特異的な免疫反応です。

    HIV はパントロペンですが、主な標的細胞は T ヘルパーであり、膜上に何百もの CD4+ 受容体分子を持っています。 体内では、ウイルスは攻撃性の低い状態から攻撃性の高い状態に変化します。これは、血液中の CD4+ リンパ球の数が徐々に減少して完全に消失し、重み付けにつながることで表されます。 臨床写真.

    感染の瞬間から特定の抗ウイルス抗体の出現まで、原則として6〜8週間かかります。 感染から血清中の検出可能な HIV 抗体の出現までの期間は、「ウィンドウ」期間と呼ばれます。

    一方で、免疫系はウイルスの標的であり、他方では、それ自体がウイルスに対する特異的な抗体を産生します。 同時に、 免疫系自己免疫プロセスが発生し、体の細胞や組織の破壊プロセスが悪化します。

    HIV感染は、特定の臨床像がないことを特徴としており、その診断は、原則として、慎重に収集された既往歴に基づいて、検査室での診断によって確認された多くの兆候と組み合わせて行われます。 1983 年に、WHO は、血清学的診断がない場合に HIV 感染の存在を確立する特定の基準 (基準「Bangi」) を開発しました。 これらには以下が含まれます:

    - 元の体重の 10% 以上の体重減少;

    - 1か月以上の慢性下痢;

    長引く発熱 1か月以内(永続的または断続的)。

    - 1 か月以上持続する咳;

    - 全身性そう痒性皮膚炎;

    - 帯状疱疹の病歴;

    - 慢性進行性または播種性ヘルペス感染症 (単純ヘルペス);

    これらの基準による HIV 感染の診断は、患者が持っている場合に行うことができます。 同時に少なくとも 2 つの「大きい」フィーチャと 1 つの「小さい」フィーチャ。 AIDS の診断の十分な根拠は、患者の全身カポジ肉腫またはクリプトコッカス髄膜炎の検出である可能性があります。 これらの基準の感度と特異度が低いため、WHO はその後、診断の血清学的確認を要求しました。

    HIV感染症の臨床分類:

    一次症状の段階:

    A.急性発熱期;

    B.無症候性段階;

    B.持続性の全身性リンパ節腫脹。

    二次疾患の段階:

    A. 10 kg未満の体重減少、皮膚および粘膜の表面的な細菌性、ウイルス性、真菌性病変、帯状疱疹、繰り返される咽頭炎、副鼻腔炎。

    B. 10 kg を超える進行性の体重減少、原因不明の下痢、1 か月を超える発熱、毛むくじゃらの白板症、肺結核、反復または持続性の細菌、真菌、ウイルス、内臓の原虫病変 (播種を伴わない)、または内臓の深部病変皮膚と粘膜、反復および播種性帯状ヘルペス、ローカライズされたカポジ肉腫。

    病気の段階に応じたHIVに対する抗体の存在。

    血液中のHIVに対する抗体

    HIV検査結果

    Ⅱ. 主な症状

    B. 無症候期

    III. 二次疾患

    ウイルスが体内に入ると、血液中で増殖します。 この期間中の感染者の 50% で、体温が 38.5 ~ 39.5 °C に上昇し、その他の単核症様症状が 3 ~ 10 日間続く前駆状態が発生することがあります。 この状態は、インフルエンザ感染後の回復期間に似ています。

    病気の6〜8週目から、血中の抗体レベル、つまりセロコンバージョンが増加します。 この期間中、全身性リンパ節腫脹および軽度の免疫不全が発生する可能性がありますが、一部の患者では、HIV 感染の臨床症状は最小限です。 後天性ヒト免疫不全症(AIDS)の顕著な症候群では、内臓の日和見感染症が急速に発症し、影響を受けます 神経系. 皮膚や粘膜では、腐生菌叢の活性化が観察されます。 カポジ肉腫やその他の腫瘍が発生します。 結核、梅毒、深在性真菌症などの感染症は、より活発になる可能性があります. ニューモシスチス肺炎は、HIV感染者の典型的な病気です. 一部の患者では、肝臓と脾臓が拡大していますが、これは好ましくない兆候であり、プロセスが急速に進行していることを示しています。 HIV 感染には、酵母菌による髄膜炎、トキソプラズマ性脳膿瘍、急性および亜急性脳炎、孤立性脳腫瘍 (リンパ腫) などの脳型があります。 患者は、さまざまな血管病変を呈することがあります。

    非特異的診断法には、血液中のTリンパ球亜集団の含有量の決定、末梢血または生検材料中のTリンパ球の反応性の活性の評価が含まれます。

    具体的な診断方法には次のものがあります。

    - PCR によるヒト細胞中のプロウイルス DNA または HIV ウイルス RNA の検出;

    - 生体液および細胞中の成熟した感染性ビリオンの検出;

    - ウイルスの可溶性タンパク質(抗原)の測定;

    - HIV に対する抗体の測定 (ELISA、免疫ブロット、凝集反応、放射性免疫沈降)。

    最も一般的なスクリーニング診断法は ELISA です。 否定的な結果は、次のことを示している可能性があります。

    - 感染がないことについて;

    - セロコンバージョンの開始前(「ウィンドウ」期間中または抗体力価の消失の他の期間中)の研究の実施について。

    肯定的な結果は、真または偽のいずれかです。 偽陽性は、慢性感染症、自己免疫疾患または腫瘍性疾患の患者、感染していない妊婦、輸血後の患者、および慢性アルコール依存症の患者を検査するときに得られる可能性があります。 HIV に対する抗体が検出される最も早い時期は、感染日から 3 ~ 4 週間です。

    確認分析。 免疫ブロット。

    スクリーニングテストの後、すべての陽性結果は別の ELISA システムでチェックされ、その後、より感度の高いテストで免疫ブロットが行われます。 この検査で確認された血清は、真陽性と見なすことができます。

    HIV検査を実施する前に、分析を実施する必要がある理由について患者に必ず相談する必要があり(検査前カウンセリング)、結果を受け取った後、それに応じて事後検査を実施する必要があります。検査結果を説明するためのカウンセリング。 機密性は、診断とその後の治療のすべての段階で守られなければなりません。

    HIV 感染の治療には主に 4 つのアプローチがあります。病因、免疫刺激、免疫置換、および病原性 (二次感染に対するもの) です。

    他のクラスのヌクレオチド類似体または阻害剤は、ウイルスの逆転写酵素を抑制する能力を持っています。 AIDS患者の治療のための最初の薬は、ヌクレオチド類似体であるアジドチミジンでした。 薬が原因 副作用、主に造血に影響を与え、長期使用(6か月以上)のほとんどの患者では、それに対する耐性が形成されます。 現在、プロテアーゼおよび逆転写酵素の阻害剤である10を超える新薬が使用されています。 作成プロセスが大幅に複雑になる 効果的な薬治療抵抗性株の出現を伴う、体内でのHIV突然変異の急速な速度。

    組み合わせたアプローチのみが、ウイルスの複製を制限し、薬剤耐性の発生を防ぐことができます。 トリプル抗レトロウイルス療法 (2 つのヌクレオシド類似体とプロテアーゼ阻害剤に基づく 3 つの薬剤の組み合わせ) が標準になっています。