A shuttle-futás ötletét a dán Jengs Bengsbo dolgozta ki, és intenzív intervallumból áll a fizikai aktivitás(intervallum állóképesség teszt, kulcsszó "erős")és a befejezése utáni felépülés képessége (intervallum helyreállítási teszt, ismét azután erős fizikai aktivitás), és a pulzusszám mérése során azt is meghatározni egyéni jellemzők a sportoló teste aerob (nagyobb mértékben) és anaerob üzemmódban.

Yo-yo teszt:

A chipek három vonalat képviselnek (lásd a fényképet). 5 méter a felépüléshez és 20 méter a futáshoz. A teszt során egymástól 20 méter távolságra lévő chipek között futunk oda-vissza. Indítsa el parancsra. A jelek közötti idő, azaz a 40 méteres szakasz megtételének ideje a szinttől függően fokozatosan csökken. A pihenés és a főfutás közötti idő 5 vagy 10 másodperc a jojo teszt típusától függően. A sportoló alacsony szintről kezdi a tesztet, ahol pihenéssel váltakozik, és egy bizonyos ideig áthalad a szegmenseken. Ezután jön a következő szint, ahol a szintekenkénti szakaszok száma növekszik, és csökken a 40 méteres szakasz teljesítésének ideje, és nő a futási sebesség. Vagyis a sportolók ismételten, megállás nélkül rándulásokat hajtanak végre felépüléssel és szintemelkedéssel. A szakasz befejezéséhez rendelkezésre álló idő csökken. A játékos kilép a jojo tesztből, ha már nem tudja teljesíteni a szakaszokat a megadott időn belül. A Yo-Yo teszt vége az a teljes táv, amelyet a sportoló a visszavonulás előtt megfutott.

Kiváló: Sebesség 19 - 20 km/h Távolság: > 2320 m Negyvenméteres szakaszok száma: >58
Nagyon jó: Sebesség 18-19 km/h Távolság: >2000 m Negyvenméteres szakaszok száma: >50
Jó: Sebesség 17-18 km/h Távolság: >1680 m Negyvenméteres szakaszok száma: >42
Rossz: Sebesség 16-17 km/h Távolság: >1360 m Negyvenméteres szakaszok száma: >34
Nagyon rossz: Sebesség 15-16 km/h Távolság: >1040 m Negyvenméteres szakaszok száma: >26

A tesztelés gondolatát semlegesíti vagy, mondhatjuk, hiteltelenné teszi a futballisták vonakodása a teszteléstől, vagy az abban való részvétel formális megközelítése. A játékosok többsége 40 méteres szakaszokon megy végig anélkül, hogy elérné a maximális pulzusszámot, és amikor jön egy küszöb, aminek átlépése erőfeszítést igényel, egyszerűen kilép a versenyből. Úgy gondolják, nincs értelme még egyszer megerőltetni magát: "Mi a kifogás ellenem, megszöktem."

A tapasztalt futballisták különösen érzékenyek az ilyen következtetésekre. Ezért az orosz csapatokban végrehajtott Yo-Yo teszt eredményeinek 75%-a a szemetesbe dobható, mivel nem adnak tájékoztatást, ellenkezőleg, összekeverik eredményeiket és vezetik az edzői stábot. és a csapatorvosok rossz irányba a csapatjátékosok funkcionális felkészültségét illetően .

Friss hírek a sportorvoslásról.

Haladó képzések a „Sportpszichológia” programban. 2019. június.

ANO DPO "Nemzeti Biomedicina és Sport Intézet"

97

Egy új futballklub csapatorvost keres. Sürgősen.

10 nap múlva kezdődik a szezon 770

Hírek a sportorvoslásról, amelyek érdekelhetik:

A Rögbi Világkupa kulcsfontosságú sikertényezőit azonosították

Brit sportorvosok egy sor vizsgálatot követően arra a következtetésre jutottak, hogy az 1987 és 2007 közötti vb-n a rögbi csapatok sikerének kulcsa a játékosok antropometriai mutatói, nevezetesen 1535

Korongdiffúziós módszer

Legfeljebb 6 antibiotikummal impregnált korongot helyezünk a vizsgált kultúrnövényekkel egybefüggő gyepre vetett sűrű tápközeg felületére, egymástól legalább 2 cm távolságra. Az eredményeket 18-24 órás termosztátos inkubáció után rögzítjük a korongok körüli antibiotikumokkal nem rendelkező zóna átmérőjének megfelelően. A korong körüli növekedés jelenléte jelzi ennek a mikrobának az antibiotikummal szembeni érzéketlenségét. Az eredmények értelmezésére speciális táblázatokat használnak.

1. ábra Az érzékenység meghatározása

mikroorganizmusok korongdiffúziós módszerrel:

1 – mikroorganizmus érzékeny antibiotikumra;

2 – mikroorganizmus közepesen ellenálló antibiotikumra;

3 – mikroorganizmus stabil egy antibiotikumra.

E-teszt módszer

A módszer elve. A mikroorganizmusok érzékenységének meghatározása a korongdiffúziós módszerrel végzett vizsgálathoz hasonlóan történik. A különbség az, hogy az antibiotikum korong helyett egy E-tesztcsíkot használnak, amely az antibiotikum koncentráció gradiensét tartalmazza a maximumtól a minimumig. A növekedésgátlás ellipszoid zónájának az E-tesztcsíkkal való metszéspontjában a minimális gátló koncentráció (MIC) értéket kapjuk.

2. ábra Mikroorganizmusok érzékenységének meghatározása E-tesztekkel

Sorozatos hígítási módszer húsleves közegben

1 ml Mueller-Hinton táplevest tartalmazó kémcsövekben készítsen kétszeres sorozathígításokat az antibakteriális gyógyszerből, például 100 µg/ml - 1., 50 µg/ml - 2., 25 µg/ml - 3., 12,5 µg/ml – 4. stb. Ezután a vizsgált baktériumszuszpenzióból 0,1 ml-t adunk minden csőhöz. Ezzel egyidejűleg növekedésszabályozást adunk be (1 ml Mueller-Hinton húsleves és 0,1 ml baktériumszuszpenzió). A növényeket 37 °C-on 18-24 órán át inkubáljuk, majd az eredményeket feljegyezzük. A zavarosság hiánya a tápközegben a baktériumok növekedésének késleltetését jelzi adott koncentrációjú gyógyszer jelenlétében.

3. ábra A MIC érték meghatározása folyékony tápközegben történő hígítással

A minimális gátló koncentráció (MIC) az antibiotikum legalacsonyabb koncentrációja (μg/ml-ben vagy mg/l-ben), amely teljesen gátolja a látható baktériumok növekedését in vitro.

2 Különböző staphylococcus-törzsek antibiotikumokkal szembeni érzékenységének meghatározása standard korongos módszerrel

Antibiotikum	Növekedésgátló zóna, mm	A törzs jellemzői

A vizsgált kultúra érzékeny a ____________________________________________________________

mérsékelten ellenáll a _________________________________________________________________________________,

ellenálló _________________________________________________________________________________.

3 A penicillin minimális gátló koncentrációjának (MIC) meghatározása sorozathígítások módszerével.

Következtetés: A penicillin MIC értéke a vizsgált törzs esetében __________________________________________

A módszer előnyei:______________________________________________________________________________________

A módszer hátrányai:_______________________________________________________________________________________

4 Antagonista hatás azonosítása és regisztrálása különböző típusok baktériumok.

Egy antagonista mikrobát és a rá merőleges teszttörzseket átmérője mentén egy csíkkal oltják be egy MPA-t tartalmazó lemezre. Az eredményeket a vetés után egy nappal rögzítjük. Az antagonista hatás jelenlétét és mértékét a vizsgált tenyészetek növekedésgátlási zónáinak mérete határozza meg.

Vonalvetés_____________________________________

Következtetés: a legnagyobb antagonista hatást a teszttörzseknél mutatták ki (fajok megadása) __________________________________________________________________________________________________________

8. LECKE

TANTÁRGY: ZÁRÓ ÓRA A TÉMÁBAN: „A MIKROORGANIZMUSOK MIKROORGANIZMUSOK MIKROBIOLÓGIÁJA, MORFOLÓGIÁJA, ÉLETTANA ÉS GENETIKÁJA FEJLŐDÉSÉNEK TÖRTÉNETI SZAKASZAI.”

Az igazi baktériumok alakja és mérete. A valódi baktériumok gömbölyű, rúd alakú és csavart formáinak jellemzői.

A baktériumok szerkezete. A fő különbségek a prokarióta sejt és az eukarióta sejt között.

Gram-pozitív és gram-negatív baktériumok sejtfala.

A mikroszkópos készítmények fajtái. Fix készítmények elkészítésének technikája.

A mikroszkópos vizsgálat technikája fénymikroszkópban. Mikroorganizmusok morfológiájának vizsgálata elektronmikroszkóppal.

A mikrobák tintoriális tulajdonságai. Színezékek. A rögzített készítmények festésének egyszerű módszerei.

A patogén prokarióták osztályozásának elvei (Burgee, 2001).

Védőeszközök mikroorganizmusokban. Spórák, a spóraképződés szakaszai és körülményei, biológiai jelentősége.

Bakteriális kapszulák, jelentésük.

Flagella, szerkezetük. Cilia. Szexivás.

Komplex festési módszerek. Gram, Ziehl-Neelsen, Burri-Gins, Neisser festési technikák.

Módszerek élő állapotban élő mikroorganizmusok vizsgálatára. CON teszt. A módszer elve.

Spirochetes. A spirocheták szisztematikus helyzete és morfológiája. Az ultrastruktúra és a kémiai összetétel jellemzői. Kutatási módszerek.

Actinomycetes, morfológia, ultrastruktúra, kémiai összetétel. Patogén fajok. Az aktinomyceták szerepe a természetben és az orvostudományban. Észlelési módszerek.

A chlamydia taxonómiája. Morfológia, szerkezet, kimutatási módszerek. A chlamydia fejlődési ciklusa.

Rickettsia, morfológia, ultrastruktúra, kémiai összetétel. Patogén fajok.

Mikoplazmák. Osztályozás. Törzsfejlődés. Kimutatási módszerek.

A mikrobák hibás formái: protoplasztok, szferoplasztok, L-formák.

A baktériumok táplálkozása. A tápanyagok szén- és nitrogénforrások. A baktériumok osztályozása táplálkozás típusa szerint Autotrófok és kemoorganotrófok

Növekedési tényezők és forrásaik. Ásványi elemek forrásai.

A membránon keresztüli tápanyagtranszfer módszerei és mechanizmusai.

A baktériumok energiaigénye. Az autotrófok energianyerésének módjai (fotoszintézis, kemoszintézis). Az energiaforrások és az energiaszerzés módjai a kemoorganotrófokban.

A biológiai oxidáció aerob és anaerob típusai baktériumokban. Aerob, anaerob, fakultatív anaerob és mikroaerofil baktériumok. Anaerob körülmények megteremtésének módszerei.

A bakteriológiai (kulturális) kutatási módszer céljai, szakaszai, előnyei és hátrányai.

A mikroorganizmusok növekedése és szaporodása. Szaporodási módszerek. Bináris (egyszerű) hasadás, mechanizmus. A baktériumpopulációk szaporodása.

A baktériumtenyésztés elvei és módszerei. A mikrobák táplálkozási igényei.

Tápközeg baktériumok tenyésztéséhez. A tápközegekre vonatkozó követelmények. A tápközegek osztályozása.

A baktériumok tenyésztésének feltételei és technikái. A táptalajra történő vetés technikája. A baktériumok szaporodásának mintái és természete szilárd és folyékony táptalajokon.

Módszerek aerob és anaerob baktériumok tiszta kultúráinak izolálására.

Az izolált kultúrák azonosítására használt mikroorganizmusok tulajdonságai.

Bakteriális enzimek, osztályozás. Módszerek a mikroorganizmusok biokémiai tulajdonságainak vizsgálatára. A biokémiai aktivitás gyakorlati felhasználása a bakteriális azonosításban

Szacharolitikus tulajdonságok meghatározása, Hiss táptalaj összetétele; proteolitikus tulajdonságok meghatározása, kataláz és oxidáz aktivitás meghatározása.

A baktériumtenyészetek automatikus azonosítására szolgáló eszközök (hemokultivátor, automata analizátor) működési elve és használatának jellemzői.

A rickettsia és a chlamydia termesztésének jellemzői.

Bakteriofágok (fágok). A felfedezés története. A fágok morfológiája, szerkezeti jellemzői, kémiai összetétele és tulajdonságai.

Virulens fágok. A baktériumsejttel való kölcsönhatás fázisai. A fág és a sejt közötti kölcsönhatás eredményei. Mérsékelt égövi fágok. Prophage. A lizogén jelensége. Fág konverzió.

Módszerek bakteriofágok izolálására és titrálására szilárd és folyékony táptalajokon Fágok alkalmazása a mikrobiológiában és az orvostudományban. Fágdiagnosztika és fágtipizálás.

Átöröklés. A genetikai apparátus szerveződése baktériumokban (nukleoidok, plazmidok, Is-szekvenciák, transzpozonok).

A bakteriális genom működésének elvei. Az operon felépítése. Genotípus és fenotípus.

Plazmidok, osztályozás, plazmidok szerkezete és tulajdonságai. R-plazmid, szerkezeti és működési jellemzők. Bakteriocinogén plazmidok.

Mikrobiális variabilitás. A baktériumok változásai, jelentősége, főbb megnyilvánulásai és tulajdonságai (nem örökletes természet, alkalmazkodóképesség, direkt és fordított változások nagy gyakorisága, számos indukáló tényező).

Genotípusos variabilitás. Mutációk és osztályozásuk. Mutagének. A mutációk fenotípusos megnyilvánulásai. A mutánsok sorsa. Disszociáció a baktériumokban. A kiválasztás hatása. Genomkárosodás javító rendszer.

Rekombinációs változékonyság. Kombinált genomok kialakulásának mechanizmusai. Az egyéni jellemzők változásának gyakorisága. Átalakítás, transzdukció, konjugáció.

A mikrobák genetikájával kapcsolatos ismeretek gyakorlati jelentősége. A genetikai térképezés alapelvei.

Genetikai elemzési módszerek (molekuláris hibridizáció, polimeráz láncreakció, blottolás, szekvenálás).

A géntechnológia fogalma és módszereinek alkalmazása a mikrobiológiában és a biotechnológiában. Génmanipulált vakcinák és citokinek előállítása és felhasználása.

Antimikrobiális intézkedések. A környezeti tényezők hatása a mikrobákra. Fizikai tényezők (hőmérséklet, szárítás, sugárzás, ultrahang, ozmotikus nyomás) hatása. Kémiai tényezők hatása.

A sterilizálás és fertőtlenítés céljai, módszerei, eszközei és tárgyai az orvosi és mikrobiológiai gyakorlatban. Fertőtlenítés minőségellenőrzése. A sterilizálás és a sterilitás ellenőrzése. Végrehajtási módszerek.

Fertőtlenítő.

Meghatározás. Antiszeptikus szerek, követelmények, eredet, tulajdonságok, csoportok, hatásmechanizmusok a mikrobákon. Az antiszeptikumok típusai. Terápiás antiszeptikumok. Megelőző antiszeptikumok.

Kemoterápiás gyógyszerek. Tulajdonságok. A kemoterápiás gyógyszerek fő csoportjai. Hatásmechanizmusok baktériumokra. A szelektivitás fogalma és a cselekvés „céljai”.

Antibiotikumok. Meghatározás. Az antibiotikumok gyártói. Szintetikus és félszintetikus antibiotikumok.

Az antibiotikumok fő csoportjai kémiai szerkezet szerint. Béta-laktám antibiotikumok Tetraciklinek. Aminoglikozidok. Makrolidok és azolidok. Ansamicinek (rifampicinek). Levomycetin. Fluorokinolon antibiotikumok. Linkomicin. Polimixinek. Glikopeptidek

Az antibiotikumok osztályozása a baktériumsejtre gyakorolt ​​hatásmechanizmus alapján.

A mikroorganizmusok antibakteriális gyógyszerekkel szembeni rezisztenciájának mechanizmusai.

A baktériumok antibiotikumokkal és más kemoterápiás gyógyszerekkel szembeni érzékenységének meghatározására szolgáló módszerek. Az érzékenység beállításának, rögzítésének és értékelésének technikája lemezes módszerrel, E-teszt, soros hígítások.9

TANTÁRGY: A BAKTÉRIUMOK ÖKOLÓGIÁJA. FERTŐZÉS. KÓROS MIKROORGANIZMUSOK. MIKROBIÁLIS TOXINOK. BIOLÓGIAI (KÍSÉRLETI) MÓDSZER.

ELLENŐRZŐ LISTA

Az emberi test mikroflórája . Normál (rezidens) emberi mikroflóra. Autochton és allochton, parietális és luminális mikroflóra. Normál mikroflóra kialakulása és fejlődése. A normál mikroflóra funkciói: fertőzésellenes, metabolikus, immunbiológiai, antitoxikus.

Dysmicrobiocenosis (dysbacteriosis), okai, típusai, a korrekció elvei.

A fertőzés fogalma. Definíció, általános jellemzők. A fertőző betegségek és a nem fertőző betegségek közötti különbségek.

A mikroorganizmus szerepe a fertőzési folyamatban. Fertőző adag. A fertőzés módszerei. Bejárati kapu. Patogenitás és virulencia. A patogenitás és a virulencia genetikai szabályozása. A mikrobák virulenciáját növelő és csökkentő tényezők.

Patogenitási tényezők. A virulencia meghatározásának módszerei, mértékegységei. Kötelező patogén és feltételesen patogén mikroorganizmusok.

A mikroorganizmusok toxicitása és toxicitása. Endotoxinok, tulajdonságai, előállítása, alkalmazása. Exotoxinok, tulajdonságai, előállítása, mértékegységei. Az exotoxinok fajtái, hatásmechanizmusa.

A makroorganizmus szerepe a fertőző betegségek kialakulásában és lefolyásában. Örökletes tényezők. A test anatómiai és élettani állapota. Az életkörülmények szerepe a fertőző betegségek kialakulásában és lefolyásában. Természeti tényezők. Társadalmi tényezők.

A fertőző folyamatok osztályozása súlyosság, a kórokozó jellege, a fertőzés forrása, a kórokozó átviteli módja és a fertőzés mechanizmusa, valamint a prevalencia szerint. A fertőző folyamatok osztályozása a mikrobiális fókusz lokalizációja, a lefolyás időtartama és a fertőzés gyakorisága szerint.

Dinamika fertőző folyamat, jellemzői.

Biológiai (kísérleti) kutatási módszer, szakaszok, értékelés. Laboratóriumi állatok. A fertőzés módszerei.

LABORATÓRIUMI MUNKÁK

1 Tanulmányok normál mikroflóra.

A) Vetés a kézbőr normál mikroflórájának vizsgálata Endo táptalajon és véragaron replika módszer.

A módszer elve: nedvesítse meg a steril szűrőpapír 1x1 cm-es darabjait egy Petri-csészében steril sóoldattal. megoldás. Steril csipesszel 0,5 percre helyezzen egy papírlapot a vizsgálandó bőrfelületre. Helyezze a papírt a sűrű tápközeg (nyomtatás) felületére 1 percre. Távolítsa el a papírt. Inkubálja a lemezeket lenyomatokkal 37 0 C-on 24-48 órán keresztül.

C) Mikroflóra oltás nyilvántartása, preparátumok készítése különböző típusú telepekből, Gram festés, mikroszkóp (bemutató oltásban).

A mikroflóra beoltásának számítása:

A készítmények mikroszkópos vizsgálata:

Drog______________ _______________________ Színezés _______________ _______________________

Drog______________ _______________________ Színezés _______________ _______________________

2 Tapadóképesség értékeléseE. colia vörösvértestek felületén való adszorbeáló képességük révén

A módszer elve: A mikroorganizmusok teszttenyészetét hozzáadjuk az eritrocita-szuszpenzióhoz. Az inkubálás után keneteket készítenek, megfestik, és mikroszkóp alatt meghatározzák az egy vörösvértesten adszorbeált baktériumok átlagos számát.

Ebben az esetben a vörösvérsejteket egy fogékony mikroorganizmus modellsejtjeként használják.

3 Invazivitás enzimek meghatározása staphylococcusokban

1. Plazmokoaguláz

A módszer elve: A teszttenyészetet citrált nyúlvérplazmát tartalmazó kémcsőbe adjuk. A termosztátban történő inkubálás után az eredményt a rendszer figyelembe veszi. Ha az eredmény pozitív, a plazma megalvad (koagulál).

2.Fibrinolizin

A módszer elve: A teszttenyészetet fibrinnel (vörösvértestekből kimosott vérrög) egy kémcsőbe helyezzük. A termosztátban történő inkubálás után az eredményt a rendszer figyelembe veszi. Ha az eredmény pozitív, a vérrög feloldódik.

3.Hialuronidáz

A módszer elve: A teszttenyészetet hialuronsavval (HA) tartalmazó kémcsőbe adjuk. A termosztátban történő inkubálás után a HAA koagulációját okozó reagenst adnak hozzá, és az eredményt figyelembe veszik. Ha az eredmény pozitív (a HAA lebomlása miatt), nem képződik vérrög.

4.Lecitovitelláz (lecitináz)

A módszer elve: az izolált staphylococcus tenyészeteket 7,5% nátrium-kloridot és sárgája szuszpenziót tartalmazó sárgás-sós agaron oltjuk be. Ha az eredmény pozitív, a csirketojás sárgájában lévő lecitin lebomlása miatt szivárványos halo képződik a virulens staphylococcusok telepei körül.

Következtetés: (sorolja fel mind a két vizsgált törzs virulencia enzimeit) __________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

Bakteriális toxinok

Toxicitás __________________________________________________________________________________________

Toxogenitás ______________________________________________________________________________________

Endotoxin ___________________________________________________________________________________________

Endotoxikus sokk ________________________________________________________________________________

Az endotoxinok gyakorlati alkalmazása:

Exotoxin ____________________________________________________________________________________________

Anatoxin __________________________________________________________________________________________

Az exotoxin és a toxoid kinyerésének sémája.

1.____________________________________________________________________________________________

2.____________________________________________________________________________________________

4.____________________________________________________________________________________________

A toxoidok gyakorlati alkalmazása:

1.____________________________________________________________________________________________

2.____________________________________________________________________________________________

3.____________________________________________________________________________________________

Az előadás az érzékenység meghatározásának főbb módszereit tárgyalja in vitro mikroorganizmusoktól antimikrobiális gyógyszerekig (korong diffúzió, E-tesztek, hígítási módszerek). Az antibiotikumok empirikus és etiotróp felírásának megközelítései a klinikai gyakorlatban tükröződnek. Az érzékenység-meghatározás eredményeinek klinikai és mikrobiológiai szempontból történő értelmezésének kérdéseit tárgyaljuk.

Jelenleg a klinikai gyakorlatban az antibakteriális gyógyszerek felírásának két alapelve van: empirikus és etiotróp. Empirikus antibiotikum recept a baktériumok természetes érzékenységének ismeretén, a régióban vagy kórházban élő mikroorganizmusok rezisztenciájának epidemiológiai adatain, valamint az ellenőrzött klinikai vizsgálatok. A kemoterápia empirikus felírásának kétségtelen előnye a terápia gyors megkezdésének lehetősége. Ezenkívül ez a megközelítés kiküszöböli a további kutatások költségeit.

Ha azonban a folyamatban lévő antibakteriális terápia hatástalan, nosocomiális fertőzések esetén, amikor nehéz kitalálni a kórokozót és annak antibiotikum-érzékenységét, inkább etiotróp terápiát végeznek. Antibiotikumok etiotróp felírása nemcsak a fertőző ágens klinikai anyagból történő izolálását foglalja magában, hanem annak antibiotikumokkal szembeni érzékenységének meghatározását is. Pontos adatok beszerzése csak a bakteriológiai kutatás minden szakaszának hozzáértő végrehajtásával lehetséges: a klinikai anyag felvételétől a bakteriológiai laboratóriumba szállításon, a kórokozó azonosításán át az antibiotikum-érzékenység megállapításáig és a kapott eredmények értelmezéséig.

A második oka annak, hogy meg kell határozni a mikroorganizmusok antibakteriális gyógyszerekkel szembeni érzékenységét, hogy epidemiológiai adatokat szerezzünk a közösségben szerzett és a kórházi fertőzések kórokozóinak rezisztenciájáról. A gyakorlatban ezeket az adatokat az antibiotikumok empirikus felírásánál, valamint a kórházi receptúrák kialakításánál használják fel.

Az antibiotikumokkal szembeni érzékenység meghatározásának módszerei

A baktériumok antibiotikumokkal szembeni érzékenységének meghatározására szolgáló módszerek 2 csoportra oszthatók: diffúziós és hígítási módszerek.

Az érzékenység korongdiffúziós módszerrel történő meghatározásakor egy Petri-csészében egy bizonyos sűrűségű (általában a McFarland 0,5-ös zavarossági standardnak megfelelő) baktériumszuszpenziót viszünk fel az agar felületére, majd bizonyos mennyiségű antibiotikumot tartalmazó korongokat helyezünk el. . Az antibiotikum diffúziója az agarba a mikroorganizmusok szaporodását gátoló zóna kialakulásához vezet a korongok körül. Miután az edényeket egy éjszakán át termosztátban 35 o -37 o C hőmérsékleten inkubáltuk, az eredményt a korong körüli zóna átmérőjének milliméterben mérésével vesszük figyelembe ().

1. kép Mikroorganizmusok érzékenységének meghatározása korongdiffúziós módszerrel.

A mikroorganizmusok érzékenységének meghatározása az E-teszttel hasonlóan történik, mint a korongdiffúziós módszerrel. A különbség az, hogy az antibiotikumot tartalmazó lemez helyett egy E-tesztcsíkot használnak, amely az antibiotikum-koncentrációk gradiensét tartalmazza a maximumtól a minimumig (). A növekedésgátlás ellipszoid zónájának az E-tesztcsíkkal való metszéspontjában a minimális gátló koncentráció (MIC) értéket kapjuk.

2. ábra. Mikroorganizmusok érzékenységének meghatározása E-teszttel.

A diffúziós módszerek kétségtelen előnye a könnyű tesztelés és hozzáférhetőség bármely bakteriológiai laboratóriumban. Tekintettel azonban az E-tesztek magas költségére, a korongdiffúziós módszert általában rutinmunkára használják.

Tenyésztési módszerek Az antibiotikum koncentrációk kettős sorozathígításán alapulnak a maximumtól a minimumig (például 128 μg/ml, 64 μg/ml stb. 0,5 μg/ml-ig, 0,25 μg/ml-ig és 0,125 μg/ml-ig). Ebben az esetben az antibiotikumot különböző koncentrációkban folyékony tápközeghez (leveshez) vagy agarhoz adjuk. Egy bizonyos sűrűségű, a McFarland 0,5-ös zavarossági standardnak megfelelő baktériumszuszpenziót ezután antibiotikumos táptalajba vagy egy agarlemez felületére helyezzük. Egy éjszakán át 35–37 o C-on történő inkubálás után a kapott eredményeket feljegyezzük. A mikroorganizmusok szaporodása a lében (leves zavarossága) vagy az agar felületén azt jelzi, hogy az antibiotikum adott koncentrációja nem elegendő az életképességének elnyomására. Az antibiotikum-koncentráció növekedésével a mikroorganizmus növekedése romlik. Az antibiotikum első legalacsonyabb koncentrációja (soros hígítások sorozatából), ahol a baktériumok szaporodása vizuálisan nem határozható meg, a minimális gátló koncentráció (MIC). A MIC-t mg/l-ben vagy μg/ml-ben mérik ().

3. ábra. A MIC érték meghatározása folyékony tápközegben történő hígítással.

Az érzékenységi eredmények értelmezése

A kapott mennyiségi adatok (az antibiotikum növekedést gátló zóna átmérője vagy MIC-érték) alapján a mikroorganizmusokat érzékeny, közepesen rezisztens és rezisztens () csoportokra osztják. E három érzékenységi (vagy ellenállási) kategória megkülönböztetésére az ún határkoncentrációk(töréspont) antibiotikum (vagy a mikroorganizmusok növekedését gátló zóna átmérőjének határértékei).

4. ábra. A baktériumok érzékenységének megállapításának eredményeinek értelmezése a MIC értékek szerint.

A határkoncentrációk nem változtathatatlan értékek. A mikrobapopuláció érzékenységében bekövetkezett változások függvényében módosíthatók. Az értelmezési kritériumok kidolgozását és felülvizsgálatát vezető szakemberek (kemoterapeuták és mikrobiológusok) végzik, akik speciális bizottságok tagjai. Az egyik az Egyesült Államok Klinikai Laboratóriumi Szabványok Nemzeti Bizottsága (NCCLS). Jelenleg az NCCLS szabványokat világszerte elismerik, és nemzetközi szabványokként használják a baktériumok érzékenységének meghatározásának eredményeinek értékelésére többközpontú mikrobiológiai és klinikai vizsgálatok során.

Kétféle megközelítés létezik az érzékenységi eredmények értelmezésére: mikrobiológiai és klinikai. A mikrobiológiai értelmezés a baktériumok életképességét elnyomó antibiotikum-koncentrációk eloszlásának elemzésén alapul. A klinikai értelmezés az antibiotikum-terápia hatékonyságának értékelésén alapul.

Érzékeny mikroorganizmusok (érzékenyek)

Klinikailag a baktériumok érzékenynek minősülnek (figyelembe véve a kapott paramétereket in vitro), ha ezen mikroorganizmusok által okozott fertőzések standard dózisú antibiotikumokkal történő kezelésekor jó terápiás hatás figyelhető meg.

Megbízható klinikai információk hiányában az érzékenységi kategóriákra való felosztás a kapott adatok együttes elszámolásán alapul in vitro, és a farmakokinetika, i.e. a fertőzés helyén (vagy a vérszérumban) elérhető antibiotikum-koncentrációkon.

Rezisztens mikroorganizmusok

A baktériumok akkor minősülnek rezisztensnek (rezisztensnek), ha az ezen mikroorganizmusok által okozott fertőzés kezelése során a terápia még akkor sem fejti ki hatását. maximális dózisok antibiotikum. Az ilyen mikroorganizmusok rezisztencia mechanizmussal rendelkeznek.

Közepes rezisztenciájú mikroorganizmusok (köztes)

Klinikailag a baktériumok közepes rezisztenciájáról akkor beszélünk, ha az ilyen törzsek által okozott fertőzések eltérő terápiás kimenetelűek lehetnek. A kezelés azonban sikeres lehet, ha az antibiotikumot a szokásosnál magasabb dózisban alkalmazzák, vagy a fertőzés olyan területen lokalizálódik, ahol az antibakteriális gyógyszer nagy koncentrációban halmozódik fel.

Mikrobiológiai szempontból a közepes rezisztenciájú baktériumok egy olyan alpopulációt foglalnak magukban, amely a MIC értékeknek vagy a zónaátmérőknek megfelelően az érzékeny és rezisztens mikroorganizmusok között helyezkedik el. Néha a közepesen rezisztens törzseket és rezisztens baktériumokat a rezisztens mikroorganizmusok egy kategóriájába egyesítik.

Meg kell jegyezni, hogy a baktériumok antibiotikumokkal szembeni érzékenységének klinikai értelmezése feltételes, mivel a terápia eredménye nem mindig csak az antibakteriális gyógyszer kórokozóval szembeni aktivitásától függ. A klinikusok tisztában vannak azokkal az esetekkel, amikor a mikroorganizmusok rezisztensek a kutatások szerint in vitro, jó klinikai hatást kapott. Ezzel szemben, ha a kórokozó érzékeny, a terápia hatástalan lehet.

Bizonyos klinikai helyzetekben, amikor a hagyományos módszerekkel végzett érzékenységvizsgálatok eredményei nem elegendőek, meghatározzák a minimális baktericid koncentrációt.

Minimális baktericid koncentráció (MBC)- az antibiotikum legalacsonyabb koncentrációja (mg/l vagy μg/ml), amely a vizsgálat során in vitro a mikroorganizmusok 99,9%-ának pusztulását okozza a kezdeti szintről egy bizonyos idő alatt.

Az MBC értékét a bakteriosztatikus hatású antibiotikumokkal végzett terápiában, vagy az antibakteriális terápia hatásának hiányában a betegek egy speciális kategóriájában alkalmazzák. Az MBC meghatározásának speciális esetei lehetnek például bakteriális endocarditis, osteomyelitis vagy általános fertőzések immunhiányos betegeknél.

Végezetül szeretném megjegyezni, hogy ma még nincsenek olyan módszerek, amelyek lehetővé tennék, hogy teljes biztonsággal megjósolhassuk az antibiotikumok klinikai hatását a fertőző betegségek kezelésében. Ezek az érzékenységi eredmények azonban jó útmutatóként szolgálhatnak a klinikusok számára az antibakteriális terápia kiválasztásához és beállításához.

Asztal 1. A bakteriális érzékenység értelmezésének kritériumai

Osztályozás, a megvalósítás általános megközelítései. Diffúziós módszerek: papírkorongos módszer, E-teszt.

A baktériumok antibiotikumokkal szembeni érzékenységének meghatározására szolgáló módszerek 2 csoportra oszthatók:
1. Diffúziós módszerek:
. antibiotikus korongok használatával
. E-tesztek segítségével
2. Sorozathígítási módszerek:
. hígítás folyékony tápközegben (leves)
. hígítás agar táptalajon
Az érzékenység meghatározására szolgáló módszereket a 60-as évek második felében – a 20. század 70-es éveinek elején fejlesztették ki, és azóta módszertani szempontból alapvető változáson nem mentek keresztül.
A következő lépések minden módszerre jellemzőek:
- táptalaj előkészítése és minőségellenőrzése
- teszt mikroorganizmusok szuszpenziójának elkészítése (oltóanyag)
- beoltás
- diffúziós módszereknél - az E-teszt korongok vagy csíkok szilárd táptalajra történő felhordásának szakasza.
- inkubáció
- az eredmények rögzítése és értelmezése
- kezelési ajánlások megfogalmazása
A diffúziós módszerek egy antibakteriális gyógyszer (ABP) diffúzióján alapulnak a hordozóból egy mikroorganizmussal beoltott szilárd táptalajba, és rögzítik a vizsgált mikroorganizmus növekedését gátló (késleltetési) zóna átmérőjét.
. A módszer kevésbé érzékeny és kevésbé pontos, mint a soros hígítási módszer, de egyszerűsége miatt gyakrabban használják a gyakorlatban. Feladva a ref.rf.
. Bármely gyógyszer agarba való diffúziójának sebessége függ annak szerkezetétől, molekulatömegétől, a szennyeződések jelenlététől, a táptalaj összetételétől és pH-jától.
Antibiotikumos papírkorongok módszere (korongdiffúziós módszer).
. Ennek a módszernek a végrehajtásához standard korongokat használnak, amelyek bizonyos mennyiségű antibiotikumot és az ilyen típusú mikroorganizmusok növekedéséhez szükséges standard tápközeget tartalmaznak. Bizonyos határokon belül a növekedésgátló zóna átmérője fordítottan arányos a MIC-vel. . Egy Petri-csészében meghatározott sűrűségű baktériumszuszpenziót viszünk fel az agar felületére. . Bizonyos mennyiségű antibiotikumot tartalmazó korongokat helyeznek el. . Inkubálja az egyes mikroorganizmusok számára kedvező körülmények között. . A korong körüli növekedésgátló zónák átmérőjét milliméterben mérjük (figyelembe véve a korong átmérőjét). . Az eredményt egy speciális táblázat segítségével értékeljük, összehasonlítva a vizsgált termény növekedésgátlási zónáinak átmérőjét a táblázatban szereplő zónaátmérő határértékeivel. . A vizsgált kultúra három kategóriába sorolható: érzékeny, közepesen érzékeny és rezisztens.

E-teszt (E-teszt vagy epszilometriás módszer)
A módszer technológiájában közel áll a papírlemezes módszerhez.
. Egy keskeny polimercsíkot (0,5x6,0 cm) használnak hordozóként, amelyre az ABP-koncentráció gradiensét alkalmazzák (minimálistól a maximumig). Az ABP koncentrációértékek a csík minden szakaszában a külső (a kutató felé néző) felületen vannak jelölve.
. A mikroorganizmusok növekedésének gátlása a hordozócsík körül abban a zónában következik be, ahol a hordozóból kidiffundáló antibiotikum koncentrációja magasabb, mint a MIC.
. A növekedésgátló ellipszoid zóna és az E-tesztcsík metszéspontjában kapjuk meg a MIC értéket.
Az E-teszt egyesíti a papírkorongos módszer egyszerűségét a soros hígítási módszer pontosságával.

Antimikrobiális terápiás gyógyszerek összehasonlító in vitro értékelésére alkalmazott módszerek: sorozathígítások módszere folyékony és szilárd tápközegben.

Sorozathígítási módszerek:
. Lehetővé teszi az izolált mikroorganizmus érzékenységének kvantitatív értékelését antibakteriális szerekés meghatározzuk a gyógyszer MIC értékét.
. A fejlesztés alatt álló generikus gyógyszer és az eredeti gyógyszer in vitro antimikrobiális aktivitásának összehasonlító értékelésére használják.
. A MIC érték meghatározásához meghatározott koncentrációjú antibiotikumot adnak a tápközeghez, amelyet azután beoltanak a vizsgált mikroorganizmus tenyészetével. Az inkubáció után értékeljük a látható növekedés jelenlétét vagy hiányát.
. A maximálistól a minimumig terjedő ABP-koncentráció kétszeres sorozathígítása alapján (például 128 μg/ml, 64 μg/ml stb. 0,5 μg/ml, 0,25 μg/ml és 0,125 μg/ml között) .
. Folyékony és agar tápközegben végzik. Sorozathígítási módszer folyékony tápközegben (leves)
Ennek a módszernek 2 lehetősége van:
makromódszer (kémcső) és mikromódszer (tányér).
Makró módszer.
. A vizsgálatot kémcsövekben, minden hígításnál 1 ml végtérfogatban kell elvégezni.
. A táplevest 0,5 ml-re öntjük minden kémcsőbe. A csövek számát az ABP szükséges hígítási tartománya határozza meg.
. A vizsgált mikroorganizmusok szuszpenziójának elkészítése:
- Minden vizsgált mikroorganizmus standard szuszpenziójából (~ 10 8 CFU/ml) munkaszuszpenziót készítünk (~ 10 6 CFU/ml). Az ABP kétszeres sorozathígításainak elkészítése: - készítsünk ABP törzsoldatot a vizsgált generikus gyógyszerből és a referencia gyógyszerből (eredeti) legalább 1000 μg/ml koncentrációban (figyelembe véve a hatóanyag). - a vizsgált generikus gyógyszer ABP és a referencia gyógyszer (eredeti) alapoldataiból folyékony táptalaj felhasználásával az ÁMT munkaoldatait készítik. (A munkaoldatok koncentrációját a sorozathígítások sorozatának szükséges maximális koncentrációja alapján számítják ki, figyelembe véve a hígítási tényezőt a mikroorganizmus szuszpenziójával történő későbbi beoltás során) - sorozathígításokat készítenek: 0,5 ml munkaoldat ABP-t adunk az első 0,5 ml húslevest tartalmazó kémcsőbe. Keverjük össze. Egy új pipetta (hegy) segítségével vigyen át 0,5 ml ABP-oldatot húslevesben egy második kémcsőbe, amely 0,5 ml húslevest stb. tartalmaz, amíg a teljes szükséges hígítási sorozatot el nem készítik. Az utolsó csőből 0,5 ml-t veszünk ki. Így egy sor ABP-oldatot tartalmazó kémcsöveket kapunk, amelyek koncentrációi a szomszédos kémcsövekben 2-szeresek. Beoltás: 0,5 ml ~ 10 6 mikroorganizmus-koncentrációjú mikrobaszuszpenziót adunk minden kémcsőbe 0,5 ml megfelelő hígítású ABP-vel. A mikroorganizmus végső koncentrációja minden csőben ~ 5x10 5 CFU/ml. . Kontroll - kémcső húslevessel és mikroorganizmus-tenyészettel (növekedéskontroll). Negatív kontroll - egy cső húslevessel (sterilitás kontroll). . Inkubálás: Az összes dugóval vagy kupakkal lezárt csövet olyan körülmények között inkubáljuk, amelyek biztosítják a vizsgált mikroorganizmusok szaporodását. . Az eredmények rögzítése és értelmezése: a tenyészeteket tartalmazó kémcsöveket áteresztő fényben nézzük. Az ABP-t tartalmazó kémcsőben lévő tenyészet növekedését összehasonlítjuk a kontrollcsővel. - a mikroorganizmusok szaporodásának jelenléte a lében (a leves elhomályosodása) azt jelzi, hogy az antibiotikumnak ez a koncentrációja nem elegendő az életképességének elnyomására. - az antibiotikum koncentráció növekedésével a mikroorganizmus szaporodása romlik. Az antibiotikum első legalacsonyabb koncentrációja (a sorozathígítások sorozatából), ahol a baktériumok szaporodása nem határozható meg vizuálisan, a minimális gátló koncentráció (MIC). gyógyszerek antibakteriális terápia - hasonlítsa össze az eredeti gyógyszerrel és a vizsgált generikus gyógyszerrel kapott eredményeket. A spektrum (a felhasznált mikroorganizmusok listája) és az antimikrobiális aktivitás mértéke (MIC-értékek) egyenértékűségére vonatkozó következtetést vonunk le.

. Az MBC meghatározása: az utolsó néhány növekedési retardált csőből oltsunk be hurokkal egy Petri-csésze szektorait. Az MBC-t, amely általában több hígítással kisebb, mint a MIC, a gyógyszer azon koncentrációjaként vesszük az utolsó kémcsőben, amelyből nem volt növekedés. . A módszer hátránya: alacsony termelékenység - az alkalmazás kis számú mikroorganizmus vizsgálatára korlátozódik.
Mikromódszer
.A vizsgálati eljárás hasonló a makromódszer használatához
.A végtérfogat legfeljebb 0,2 ml Megfelelő laboratóriumi felszerelés: 96 lyukú, steril fedelű lemez, többcsatornás pipetta a lemez üregeibe előre adagolható, majd lezárva tárolható polietilénben 60°C alatti hőmérsékleten a felhasználás pillanatáig. . A módszer előnyei: - nagy termelékenység - előre elkészített tabletták hosszú távú tárolásának lehetősége - fogyóeszközök megtakarítása. Feladva a ref.rf
Sorozathígítások módszere agar táptalajban. A vizsgálat elve hasonló a húsleves hígítási módszeréhez. A teszt mikroorganizmusok szuszpenziójának elkészítése: - minden vizsgált mikroorganizmus standard szuszpenziója ~ 10 8 CFU/ml-t tartalmazzon. - a kísérlethez használt standard mikrobaszuszpenziót ~ 10-szeresére hígítjuk, hogy ~ 10 7 CFU/ml mikroorganizmus-koncentrációt kapjunk. Az ABP kétszeres sorozathígításainak elkészítése a eredeti gyógyszerés a vizsgált generikus gyógyszert a húsleves hígítási módszeréhez hasonlóan hajtják végre. Az agar táptalajt megolvasztjuk és 45-50 °C-ra hűtjük. . Agar táptalaj és ABP hígítású edények elkészítése: az agar táptalajt és az ABP oldatokat közvetlenül egy Petri-csészében keverjük össze (90 mm átmérőjű műanyag edényeknél 2 ml ABP oldathoz adjunk 18 ml olvasztott és lehűtött agart). . Beoltás és inkubáció: bakteriológiai hurok segítségével 1-2 μl-t viszünk át a vizsgált mikroorganizmusok szuszpenziójából az agar táptalaj felületére. Így a végső inokulum dózis ~10 4 CFU (egy 3 mm átmérőjű standard bakteriológiai hurok 1-2 µl folyadékot hordoz). . Az agar felületén 5-8 mm átmérőjű folt képződik. Szárítás után az edényeket megfordítjuk és a vizsgált mikroorganizmusok szaporodásához kedvező körülmények között inkubáljuk. . Az eredmények rögzítése és értelmezése: hasonlóan a húsleves hígítási módszeréhez. A Petri-csészéket sötét, nem tükröződő felületre helyezzük. MIC-nek azt az ABP-koncentrációt vesszük, amely a látható növekedés teljes gátlását okozta. . Kontroll: az ABP nélküli mikroorganizmus-tenyészetek szuszpenziójával beoltott agarlemezek (növekedéskontroll). Negatív kontroll: agar lemezek (sterilitás kontroll). A módszer előnyei: egy lemezen több mikroorganizmus érzékenysége is meghatározható.

A generikus és eredeti antimikrobiális szerek in vitro antimikrobiális aktivitásának összehasonlító értékelésének kutatási köre.

A generikus antimikrobiális gyógyszerek in vitro antimikrobiális hatásának összehasonlító értékelésére vonatkozó kutatások köre:
.A vizsgálat célja: az antimikrobiális hatás spektrumát (mikroorganizmusok) és mértékét (MIC, MBC érték) tekintve a generikus gyógyszer referencia (eredeti) megfelelőségének igazolása.
.Tesztelt mikroorganizmusok készlete: minden mikroorganizmusból 1-2 törzs a hatásspektrumban
- referencia gyűjtőtörzsek
- kórházakban izolált klinikai törzsek
.A MIC és MBC értékei meghatározásra kerülnek
.Control: referencia gyógyszer - eredeti gyógyszer
.Várható eredmény: a kifejlesztett generikus antimikrobiális gyógyszerek MIC és MBC értékei az elfogadható értéktartományon belül vannak, és teljes mértékben egybeesnek a referencia gyógyszerek (eredeti gyógyszerek) MIC és MBC értékeivel a gyűjtő és klinikai törzsek tekintetében.
Az új antimikrobiális vegyületek in vitro antimikrobiális hatásának meghatározására szolgáló vizsgálatok eljárása:
.A referencia törzsek új vegyületeivel szembeni érzékenység kezdeti értékelése különféle típusok Gram-negatív és Gram-pozitív mikroorganizmusok (fajonként 4-5 törzs);
.Nemzetközi gyűjteményekből ismert rezisztencia-mechanizmussal rendelkező, gram-negatív és gram-pozitív mikroorganizmusok törzsei elleni vegyületek antibakteriális aktivitásának mértékének részletes vizsgálata (soros hígítási módszer);
.Oportunista és patogén mikroorganizmusok klinikai törzsei elleni aktivitás vizsgálata, összehasonlítva ismert, hasonló kémiai csoportba tartozó vagy hasonló antimikrobiális hatású gyógyszerekkel:
- Gram-pozitív mikroorganizmusok elleni túlnyomó aktivitás esetén kontroll - természetes penicillinek, I-II generációs cefalosporinok, makrolidok, linkozamidok; - Gram-negatív mikroorganizmusok elleni aktivitásra, kontroll - polimixin B, aztreonam; - drogokhoz széleskörű hatásszabályozás - félszintetikus penicillinek, aminoglikozidok, tetraciklinek, III-IV generációs cefalosporinok
. A problémás kórokozókkal szembeni antimikrobiális aktivitás értékelése: meticillin-rezisztens staphylococcusok, benzilpenicillin-rezisztens Streptococcus pneumonia, multirezisztens enterobacteriaceae, aminoglikozid-rezisztens baktériumok a Pseudomonas nemzetségbe, stb.
.Az új gyógyszerek kezdeti terápiás koncentrációit az akut toxicitást vizsgáló kísérletekben meghatározott toxicitás figyelembevételével állapítják meg;
. A gyógyszerek antibakteriális hatásának összehasonlító mértékét a MIC vagy MBC értékkel határozzák meg, amelyet a magdózis legalább 2 értékénél határoznak meg: minimum - 10 4 - 10 5 CFU/ml és maximum - 10 6 - 10 9 CFU. /ml, a kórokozó típusától függően ; A mai napig nincsenek olyan módszerek, amelyek lehetővé tennék, hogy teljes biztonsággal megjósolhassuk az antibiotikumok klinikai hatását a fertőző betegségek kezelésében. Ezek az érzékenységi eredmények azonban jó útmutatóként szolgálhatnak a klinikusok számára az antibakteriális terápia kiválasztásához és beállításához.

Előadás, absztrakt. A mikroorganizmusok antibiotikumokkal szembeni érzékenységének meghatározására szolgáló módszerek - koncepció és típusok. Osztályozás, lényeg és jellemzők.

A könyv tartalomjegyzéke nyitás bezárása

1. Gyógyszerészeti mikrobiológia. Gyógyszermikrobiológia tantárgy és feladatai.
2. Gyógyszerészet és gyógyszerészet: keletkezés és fejlődés története.
3. Orvostudomány: definíció, osztályozás.
4. A gyógyszerek összetétele | gyógyszerészeti anyag, segédanyag.
5. Eredeti és generikus gyógyszerek. A gyógyszerek neve.




10. Károsító tényezők hatása a mikroorganizmusokra. A hőmérsékleti tényező hatása és felhasználása a gyógyszeriparban.
11. A sugárzás hatása a mikroorganizmusokra, a sugárzás fajtái.
12. Kémiai károsító tényezők hatása a mikroorganizmusokra
13. Sterilizálás. Sterilitásbiztosítási szint (SAL). A sterilizációs módszer kiválasztásának kritériumai.
14. Termikus és kémiai sterilizálás
15. A sterilizáló eszközök hatékonyságának ellenőrzése.
16. Ipari fertőtlenítés
17. Fertőtlenítő és antiszeptikumok. A vegyi fertőtlenítőszerekre és antiszeptikumokra vonatkozó követelmények.
18. Tartósítószerek és felhasználásuk a gyógyszergyártásban

A „Módszerek az antimikrobiális szerekkel szembeni érzékenység meghatározására” című témakör tartalomjegyzéke. Mellékhatások antibiotikum terápia.":

Új módszerek a baktériumok kemoterápiára való érzékenységének meghatározására. Automatikus rendszerek a sorozathígítási módszer eredményeinek rögzítésére. E-teszt.

Jelenleg számítógépes rendszereket fejlesztettek ki, automatikusan vezető baktériumok izolálása a vizsgálati mintákbólés a különböző gyógyszerekre való érzékenységük meghatározása. Fő előnyük a bakteriológiai laboratóriumi személyzet felszabadítása a nagy mennyiségű rutinkutatástól és a kapott eredmények egyértelmű szabványosítása.

Ezeknek az eszközöknek a hazai gyakorlatban való elterjedtsége korlátozza költségüket. Az elérhetőbb módszerek közül a legelterjedtebbek Alamar rendszerÉs E-teszt, amely egyesíti a soros hígítási módszer és a lemezes módszer előnyeit.

Új módszerek a baktériumok kemoterápiára való érzékenységének meghatározására. Automatikus rendszerek a sorozathígítási módszer eredményeinek rögzítésére">

Automatikus rendszerek a sorozathígítási módszer eredményeinek rögzítésére(például Baxter MicroScan AutoSCAN-4) - automatizált inkubációs rendszerek beépített fotométerekkel, amelyek nefelometrikusan rögzítik a baktériumok növekedését vagy annak hiányát 24 órával a mikroorganizmusok mikropanelek lyukaiba való bejuttatása után. A működés elve azon alapul, hogy figyelembe veszik a tápközeg optikai sűrűsége különbségét azokban a kutakban, ahol baktériumok szaporodnak, és azokban a kutakban, ahol nincs növekedés. Jelenleg olyan eszközöket fejlesztettek ki (például VITEK), amelyek 4-10 órán belül eredményt adnak.

Alamar rendszer egy panel lyukakkal, amelyek mindegyike különböző koncentrációjú antimikrobiális szereket tartalmazó szűrőpapír korongokat tartalmaz, és Alamar Blue indikátorral impregnálva. A baktériumok kútba való bejuttatása után a korong kék színűvé válik, és további növekedésükkel a színe rózsaszínre változik. A korongok lyukakban való elhelyezésének sorrendje a gyógyszer kétszeres sorozathígításainak felel meg. Az utolsó, kék koronggal ellátott üreg, amely megelőzi a rózsaszínes korongokkal ellátott üregeket, megfelel a gyógyszer MIC értékének.

E-teszt[angolról ellipszis, ellipszis, mivel érzékenység jelenlétében elliptikus alakú növekedésgátlási zóna képződik] - a korongos módszer módosítása, de az utóbbi helyett különféle koncentrációjú gyógyszerekkel impregnált szűrőpapír csíkokat használnak, mindegyik ezeknek a zónáknak megfelelő jelölései vannak. A csíkokat az agar felületére helyezzük. Ha a baktériumok érzékenyek a gyógyszer hatására, ellipszoid zóna képződik a csík gátló koncentrációit tartalmazó területei körül. Formája a gyógyszer több koncentrációjának egyidejű hatásának köszönhető. A MIC a csík azon szakaszának felel meg, ahol a növekedésgátlási zóna határa áthalad.